Блок фбс размер: цены, размеры ФБС 24 6, 24 4 – МЕТАЛЛОМАРКЕТ в Москве

размеры и ГОСТ железобетонных блоков

Самый распространенный и простой вид обустройства фундамента под дом – использование бетонных блоков. Фундаментные блоки не требуют опалубки, а прочность обуславливается заводским способом изготовления, посредством применения процессов вибрирования и пропаривания бетонной смеси. Кроме строительства оснований, блоки ФБС используют для обустройства пандусов, стенок подпорного характера, заборов, эстакад и платформ. Единым регламентным документом является ГОСТ 13579, допускающий применение в производстве изделий силикатные смеси легкого типа плотностью не менее 1800кг/1м3.

ФБС в строительстве

Блоки ФБС – это фундаментные блоки сплошные, представляющие собой бруски кубической формы, изготовленные из бетонной смеси, армированные

Блоки ФБС – это фундаментные блоки сплошные, представляющие собой бруски кубической формы, изготовленные из бетонной смеси, армированные. Материал показан для применения в строительстве частного малоэтажного типа и застройке объектов различных малых форм, позволяет снизить стоимость проектов и значительно повысить оперативность проведения строительных процессов.

Важно! При создании фундамента на слабом грунте, для перераспределения нагрузки, блоки ФБС необходимо опирать на «подушки», представляющие собой вид плит призматического типа.

Преимуществами использования продукции можно назвать следующие факторы:

1. Снижение временных потерь для обустройства фундамента. Благодаря тому, что продукция не требует выдержки, как, например, основания ленточного типа, стеновые панели строения можно возводить практически сразу после выкладки фундамента.

Совет! Лучше всего заниматься обустройством основания из ФБС в теплое время года, выбрав период без дождей.

2. Наличие специальных присадок в фундаментных блоках ФБС обеспечивает высокую морозостойкость и неподверженность агрессивной среде. Благодаря этому показателю, продукция стойко переносит большие перепады температурных режимов в течение суток.
3. Модальное разнообразие. Широкий ряд типовидов позволяет подобрать размеры блоков ФБС по требованиям каждого застройщика, а качество гарантируется заводским образом изготовления железобетонных конструкций.

Важно! Изготовить самостоятельно блоки для фундамента нельзя. Отсутствие оборудования для вибропрессования приведет к нарушению технологического процесса и изделие не выдержит положенных нагрузок.

4. Стандартизированные ГОСТ размеры помогают точно просчитать количество продукции, необходимое для обустройства несущей основы.
5. При соблюдении условий монтажа, эксплуатации, блочный фундамент прослужит не менее 70-90 лет.

Совет! Несмотря на огромный ассортиментный и размерный ряд, фундаментные блоки ФБС имеют немалый вес, поэтому для подъема продукции и монтажа на место, потребуется техника.

Разновидности блочной продукции

Сегодня самым популярным материалом считается бетонный блок для строительства фундамента

Сегодня самым популярным материалом считается бетонный блок для строительства фундамента, обозначаемый аббревиатурой ФБС. Кубический продукт используется как для создания несущей основы, так и для обустройства наружных, внутренних, несущих стеновых панелей. Регламент ГОСТ стандартизирует размеры всего модельного ряда:

• Железобетонные кубы при показателе длины 2380 мм могут быть 300-600 мм толщины (шаг изменений 100 мм), высота 580 мм.
• Железобетонные бруски длины 1180 мм могут иметь толщину: 400, 500, 600 мм, высоту 580 и 280 мм.
• Доборные блоки ЖБИ (укороченные) при длине 880 мм могут быть толщиной 300-600 мм, высоты 580 мм.

Весовая градация в зависимости от размерных градаций составляет 380-1960 кг, плотность 2400кг/м3.

Рекомендуем к прочтению:

И немного о других изделиях, которые имеют некоторую сходность с продукцией ФБС:

1. ФБВ – это штучные изделия, выпускаемые малыми партиями. Отличие в том, что кубы оснащены продольным вырезом, особенно удобным для прокладки инженерных коммуникаций. Как правило, изделие имеет длину 88 см, ширину 40-60 см, высоту 58 см.
2. ФБП – продукция облегченного типа, имеющая квадратные пустоты. Имея параметры длины 238 см, ширины 40-60 см, высоты 58 см, бруски идеально подходят для обустройства стен и перегородок внутреннего типа в подвальных помещениях, а также применяются для строительства оснований под тяжелые установки промышленного свойства.

Маркировка ФБС

Все блоки фбс изготавливаются в соответствии с ГОСТ и имеют свою маркировку

В соответствии с ГОСТ, обозначение параметров продукции округляется до 1 дм. Так:

1. Сплошной блок с размерами стандартного характера обозначается ФБС 24.4.6 т (тяжелые бетоны). Минимальный вес 260 кг, максимальный 2 тонны (при плотности 2300 кг/м3).
2. Если фундаментный блок изготовлен из легкого бетона, ставится маркировка «Л» или «П» (при использовании пористого наполнителя – керамзита). Минимальный вес такой конструкции будет 230 кг, максимальный 1470 кг при плотности 1800 кг/м3.
3. Наличие буквы «С» после цифры, обозначает использование силикатного бетона в качестве одного из компонентов сырья. Масса минимум составит 163 кг, максимум 250 кг. При этом показатели длины 238 см, ширины 60 см. Плотность 2000 кг/м3.

Важно! Железобетонные кубы заводского изготовления всегда имеют пару проушин, изготовленных из стального проволочного прутка диаметром не менее 12 мм.

Петли предназначены для облегчения монтажных работ.

Характеристики продукции

Фундаментные блоки выбираются по назначению материала

Кроме того, что фундаментные блоки выбираются по плотности и массе, есть немало свойств, влияющих на определение назначения материала:

1. Типоразмер. Блоки под фундамент нужно определять по форме, назначению и маркировке:

• В форме цилиндра с литерой «Ф» — продукция, используемая для оснований свайного, столбчатого типа.
• Железобетонные изделия в форме трапеции применяются как опора под ленточное, столбчатое основание, имеют маркировку «ФЛ», параметры регламентированы ГОСТ 13580-85.
• Элементы в форме прямоугольника, оснащенные ушками на торцах – это блоки ФБС, на фото показаны именно они, применяются для устройства ленточного фундамента, строительства цокольных этажей, возведения стен. Размерные градации указаны в ГОСТ 13579-78.
• Пустотелые изделия, предназначенные для создания опалубки несъемного типа, обозначаются «ФБП».
  Показаны для строительства многоэтажек, в малоформатном частном домострое применение материала невыгодно – огромный запас прочности не будет использоваться полностью. ГОСТ 13579-78.
• Балки в форме прямоугольника, трапеции имеют маркировку «БФ» и нормированы ГОСТ 28737-90.

Расшифровка обозначений довольно проста

Расшифровка обозначений довольно проста: обозначения цифр – это габариты элементов (дм): первая – размер длины, вторая – ширины, третья – высоты. Размеры и вес продукции предусматривают применение крана, лебедки, но производители предлагают малоформатные блоки для фундамента 20*20*40 см, которые, как правило, выпускает тот же завод, что и крупноформатную продукцию. Производство включает процессы вибропрессования, при этом используется раствор портландцемента, чистого песка и крупного заполнителя, благодаря чему достигается нужная плотность раствора.

Важно! Если заполнитель гравийного типа, блок называется бетонным, если керамзит –керамзитным.

Различаются малоформатные блоки для фундамента на полнотелые и пустотелые:

Рекомендуем к прочтению:

• Полнотелые элементы показаны для обустройства оснований под малоэтажные (1-3 этажа) строения на прочных грунтах.
• Пустотелые элементы идеальны для строительства стеновых панелей.

Важно! Удобство работы обеспечено малым весом кубов – до 40 кг, однако при выкладке фундаментной основы необходимо дополнительное армирование, например, дополнение в виде армировочной сетки по горизонтальному шву. В случае ненадежности грунта, создается армопояс увеличенной высоты.

2. Морозостойкость. Определяется норматив только по сертификатам, которые выдаются на продукцию и исчисляется в количестве циклов полного замораживания/оттаивания продукции.
3. Устойчивость к агрессивным средам – еще один параметр, необходимый для учета. Выбирать тип бетона в этом случае лучше с помощью предварительно проведенного теста почвы. Тестеры продаются в магазинах строительных материалов и стоят примерно $ 2. Проведя испытания, застройщик сможет подобрать стеновый или фундаментный материал с щебенным заполнителем – они намного прочнее, чем керамзитные и более стойкие к щелочным воздействиям кислых грунтов.

Цена блоков

Цена блоков от 10 до 35$ за штуку в зависимости от конфигурации

Точно определить стоимость блоков сможет только застройщик, который не поленится прозвонить производителей и уточнить, сколько стоит та или иная продукция. Однако, примерные ценовые градации очертить можно:

1. Небольшой доборный элемент тяжелого бетона ФБС-6-3-6т стоит от $10 за штуку.
2. Цена на продукт длиной 1,2 м (ФБС-12-3-6т) будет уже от $ 16 за штуку.
3. Серия блоков длины 2,4 м и толщины в 0,4 м оценивается от $35 за штуку.

Важно! Предлагаемые на рынках жб изделия, бывшие в употреблении – не самый лучший вариант для застройщика, несмотря на весьма привлекательную цену. Наличие сколов, прочих дефектов может негативно отразиться на качестве и сроке эксплуатации готового строения. Однако, если предполагается возведение хозпостройки малого формата и рядом есть опытный застройщик, он поможет определить блочную продукцию с минимальным количеством изъянов и получится неплохая экономия на покупке стройматериала.

А вот чтобы визуально определить качество, достаточно проверить продукцию на:

• Ровную геометричность форм.
• Отсутствие сколов, кривизны.
• Выяснение плотности, путем расчета веса, параметров: для керамзитных кубов плотность не должна быть ниже 1800кг/м3, для бетонов не ниже 2000 кг/м3. Только такие элементы можно использовать для создания несущей основы.

И последний тест – сбросить блоки с одинаковой высоты – рассыпались в труху, товар явно с нарушением технологии и состава сырья. Если же сколы минимальны, то ФБС действительно хорошего качества и такое основание прослужит невероятно долго, дом будет стоять не одно десятилетие и лишь порадует качеством фундамента.

Фундаментные блоки ФБС — сортамент, вес, размеры

Сортамент ФБС (фундаментные блоки стеновые)

Марка фундаментного блока	Вес, т	Размер фундаментного блока, мм
ФБС 24-3-6т	0,975	2380x300x580
ФБС 24-4-6т	1,3	2380x400x580
ФБС 24-5-6т	1,63	2380x500x580
ФБС 24-6-6т	1,96	2380x600x580
ФБС 12-3-6т	0,49	1180x300x580
ФБС 12-4-6т	0,64	1180x400x580
ФБС 12-5-6т	0,814	1180x500x580
ФБС 12-6-6т	0,98	1180x600x580
ФБС 9-3-6т	0,326	880x300x580
ФБС 9-4-6т	0,468	880x400x580
ФБС 9-5-6т	0,51	880x500x580
ФБС 9-6-6т	0,7	880x600x580
ФБС 12-4-3т	0,31	1180x400x280
ФБС 12-5-3т	0,38	1180x500x280
ФБС 12-6-3т	0,46	1180x600x290

Монтаж фундаментных блоков

Фундаментные блоки монтируются на 3 вида основания.

• Сборные плиты ленточного фундамента
  Эти плиты маркируются индексом ФЛ и вместе со стеновыми блоками являются элементами сборного фундамента. Плиты фундамента укладываются на ровное уплотненное основание с выполненной гидроизоляцией.
• Монолитная подушка под фундамент
  По уплотненной поверхности грунта с втрамбованным песком или щебнем выполняется бетонная монолитная подушка толщиной не менее 300 мм. В случае армирования, она выполняет функцию пояся жесткости. Эта подушка может быть шире блоков ФБС и выполнять роль ленточного фундамента с уширением.
• Щебеночно-песчаное основание
  Фундаментные блоки монтируются на уплотненный слой песка или щебня толщиной 8-10 см. Перед монтажом, уплотненная поверхность проливается битумом для устройства горизонтальной гидроизоляции блока.

ФБС укладываются на цементно-песчаный раствор или бетон. Вертикальные швы заполняются бетоном. Для более надежного замоноличивания стыков ФСок, их торцы выполнены с углублениями для устройства бетонных замков. Для монтажа ФБС необходим автокран и бригада из 5-ти человек. Это из практических соображений, возможно, по технологии процесса требуется больше рабочих. Дело в том, что для укладки фундаментного блока нужно выполнить объемную постель из раствора или бетона. Даже при незначительном удалении смеси от места монтажа, это тяжелая работа. Поэтому в то время как 2 человека и кран задействованы на монтаже, 3 и более рабочих выполняют слой раствора или бетона под очередной блок фундамента.

Швы между блоками выполняются шириной до 40 мм. Для обеспечения устройства швов, длина и высота блоков меньше проектной на 20 мм. После сборки стены фундамента и замоноличивания замков, выполняется вертикальная гидроизоляция фундамента из обмазочных или оклеечных материалов.

Кроме сортаментов материалов для строительства фундаментов загородных домов у нас есть сборные плиты перекрытия.

Бетонные блоки ФБС размеры, вес и маркировка.

Бетонные блоки для стен подвалов. Виды.

      Блоки стен подвалов подразделяются на три вида: ФБС — сплошные; ФБВ — сплошные с вырезом для укладки перемычек и пропуска коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев; ФБП — пустотные (с открытыми вниз пустотами).        Ниже подробнее описаны блоки сплошные ФБС из тяжелого бетона. Если Вас интересуют ФБС из бетона на пористых заполнителях (керамзитобетон) или из плотного силикатного бетона, а также блоки ФБВ или ФБП подробную информацию читайте в ГОСТ 13579-78* «Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия».

Блоки для стен подвалов сплошные (ФБС)

       Самое широкое применение в строительстве получили бетонные блоки ФБС из тяжелого бетона (индекс Т в конце маркировки). В основном из них выполняют сборные ленточные фундаменты, стены подвалов зданий, подпорные стены удерживающие грунт. Кроме монтажных петель арматура в блоках ФБС отсутствует.

Плюсы блоков ФБС:

1. Высокая прочность.
2. Высокая скорость монтажа стен.
3. Долговечность, (как вариант возможно использовать б/у блоки).
4. Широкое распространение.
5. Большой вес (при выполнении из блоков подпорных стен).

Минусы блоков ФБС:

1. Высокая стоимость.
2. Большой вес — для разгрузки и монтажа необходим кран.
3. Высокая теплопроводность от 0.9 до 1.75 Вт/(м•град).

Маркировка

Размеры и вес блоков ФБС

       Блоки имеют стандартные размеры указанные в ГОСТ 13579-78. Ширина в зависимости от необходимой толщины стены бывает 300, 400, 500, 600 мм. Высота кратно 600 мм (580 мм блок плюс 20 мм толщина раствора) и кратно 300 мм (280 мм блок плюс 20 мм раствор). Длина 2380 мм, 1180 мм и 880 мм, вертикальный шов выполняется из раствора также толщиной 20 мм.

№ п/п	Эскиз блока	Марка изделия	Размеры в мм			Масса, т
			Длина L	Ширина b	Высота h
1		ФБС24. 3.6-Т	2380	300	580	0,97
2		ФБС24.4.6-Т	2380	400	580	1,30
3		ФБС24.5.6-Т	2380	500	580	1,63
4		ФБС24.6.6-Т	2380	600	580	1,96
5		ФБС12.4.6-Т	1180	400	580	0,64
6		ФБС12.5.6-Т	1180	500	580	0,79
7		ФБС12.6.6-Т	1180	600	580	0,96
8		ФБС12.4.3-Т	1180	400	280	0,31
9		ФБС12.5.3-Т	1180	500	280	0,38
10		ФБС12. 6.3-Т	1180	600	280	0,46
11		ФБС9.3.6-Т	880	300	580	0,35
12		ФБС9.4.6-Т	880	400	580	0,47
13		ФБС9.5.6-Т	880	500	580	0,59
14		ФБС9.6.6-Т	880	600	580	0,70

Что ещё почитать на сайте:

Фундамент из блоков ФБС пошаговая инструкция. Армирование ленточного фундамента, гидроизоляция.

Требования к ограждению строительной площадки. Примеры и фото ограждений.

Статья о том как проводить испытание свай динамической нагрузкой. Технология испытания грунтов динамической ударной нагрузкой забивными сваями.

ФБС 9.3.6: цена, характеристики, гост

Фундаментные блоки ФБС 9.3.6 представляют собой высококачественные железобетонные изделия, использующиеся для возведения фундаментов жилых, промышленных или хозяйственных объектов, подвалов, цокольных участков. Блок ФБС 9.3.6 производится по ГОСТ 13579-78 — серия 1.116.1-8. Наличие таких блоков гарантирует оперативное возведение и долгосрочную устойчивость сооружения.

ФБС 9.3.6 являются устойчивыми к низким температурам, обладают повышенной прочностью, а их характеристики отвечают требованиям современных государственных стандартов качества. Блоки способны выдерживать серьезные нагрузки и не чувствительны к резким переменам погоды и катаклизмам.

Особенности

Блок ФБС 9.3.6 обладает формой параллелепипеда, но в отдельных случаях форма может варьироваться в зависимости от конфигурации сооружения и персональных пожеланий. Поверхность как правило, гладкая, но возможны отклонения от данной закономерности при обработке гидроизоляционными смесями, являющимися гарантом водонепроницаемости бетона.

Сплошные фундаментные блоки (а именно так расшифровывается аббревиатура) используются:

— для возведения стен несущего характера;
— для строительства фундаментных оснований;
— для возведения подпорных стенок, мостов, пандусов, эстакад;
— для строительства объектов инженерного типа;
— в строительстве объектов хозяйственного и жилого направления в целом;
— для возведения ограждений и заборов.

Явным достоинством ФБС 9.3.6 является тот факт, что при использовании блоков не нужно производить технологических перерывов для приобретения материалом прочности. Фундаментные блоки разрешено применять в строительстве в любой сезон независимо от температурного режима. Этот факт помогает ощутимо сократить время, которое задействуется на возведение объекта.

К преимуществам фундаментных блоков относится следующее:

— позволяют возводить объекты независимо от погодных условий и сезона;
— на строительство тратится намного меньше времени;
— отличаются удобством монтажа;
— блоки способны выдерживать большие нагрузки и перемены температуры.

Почему выгодно приобретать фундаментные блоки именно у нашего завода:

— мы предлагаем сертифицированную и высококачественную продукцию, соответствующую последним требованиям и стандартам;
— клиент может выбрать искомый товар среди широкого спектра изделий любого размера и требуемых характеристик;
— наш завод гарантирует быструю доставку заказа;
— гуманные цены;

Маркировка ФБС 9.3.6 габариты 880х300х580

Железобетонные изделия  этой серии выпускаются в различных размерных и конструктивных вариациях, поэтому в производстве встречаются ЖБИ с различной буквенно-цифровой маркировкой.

Цифры обозначают размер (толщину изделия).

Маркировка римскими цифрами показывает тип арматуры (напрягаемая стержневая, ненапрягаемая).

Доставка ФБС 9.3.6

Доставка ФБС 9.3.6 осуществляется собственным транспортом в г. Москва, области и другим регионам России! Расчет доставки можно заказать в разделе Доставка.

Транспортировать тяжеловесный груз согласно ГОСТ 13579-78 разрешено только в горизонтальном положении в спецтранспорте. При погрузке/разгрузке запрещено перемещать по нескольку штук. Исключение: такелажные работы специальными устройствами, где допускается подъем одновременно нескольких изделий.

Блок ФБС 9.3.6 цена в Москве

Блоки ФБС 9.3.6 цена за штуку и зависит от их размера, толщины, наличия/отсутствия укрепляющих добавок, армирования. Чтобы не переплачивать за товар, целесообразно заказать напрямую от производителя на заводе ПСК Перспектива. Так вы получите сертифицированные железобетонные изделия с лабораторным заключением и по оптимальной стоимости.

Наша компания может предложить вам оптимальный баланс между качеством и стоимостью.

Наш прайс можно запросить оформить заказ в интересующем Вас разделе сайта.

Купить блок ФБС 9.3.6 на заводе ЖБИ

Выгодно купить блоки ФБС 9.3.6 в Москве без посредников на заводе ЖБИ Перспектива. Новые ФБС 9.3.6 всегда есть в наличии на наших складах. Сейчас мы наращиваем производственную мощность и ищем новых надежных партнеров.  

Аналоги написания ЖБИ на заводе жбк и дск ФБС 9.3.6, ФБС 9-3-6 ФБС9.3.6

Блоки ФБС — размеры, вес, расшифровка, маркировка

В последнее время  плиты ФБС стали одним из самых популярных материалов для возведения фундамента. Производителями предлагаются самые различные варианты заготовок с разными размерами и стоимостью. Правильно подобрав материал с оптимальными техническими характеристиками, вы сможете довольно быстро возвести прочный и надежный фундамент. О том, что такое фундаментные бетонные блоки и каковы вес и размеры блока ФБС, мы расскажем в этой статье.

ФБС: расшифровка

Итак, начнем с вопроса, что такое ФБС. Данная аббревиатура расшифровывается как «фундаментный блок сплошной». Эти блоки под фундамент представляют собой монолитные железобетонные конструкции в форме параллелепипедов. Каждый такой блок имеет прекрасные эксплуатационные характеристики, позволяющие использовать такой материал для строительства фундамента.

В основе состава – очень плотный силикатный или керамзитный бетон. Характеристики прочности улучшает стальная арматура. Она же делает блок менее восприимчивым к давлению/сжатию. Кроме того, показатели морозоустойчивости материала заметно улучшаются благодаря добавлению специальных пластификаторов.

Плюсы и минусы ФБС

ФБС-плиты широко применяются при возведении фундаментов ленточного или столбчатого типов для зданий небольшой высоты.

Среди положительных характеристик материала выделяют:

• Прекрасную несущую способность.
• Короткое время монтажа.
• Надежность, обеспеченная в первую очередь тем, что блоки производятся на заводе при соблюдении жестких норм и требований к качеству.
• Точные размеры фундаментных блоков, а также наличие монтажных пазов позволяют обеспечивать максимально плотную стыковку.
• Возведение фундамента из ФБС-плит можно проводить в любое время года. Плиты абсолютно не восприимчивы к перепадам температур.
• Основания из ФБС также могут монтироваться практически на любых грунтах. Материала невероятно стрессоустойчив.
• По завершении работ с фундаментом не нужно ждать его укрепления, как в случаях с прочими типами. Можно сразу переходить к следующему этапу строительства.

Разумеется, как у любого другого материала, у ФБС есть и свои минусы:

• Немалый вес ФБС требует привлечения специализированной техники в процессе укладки.
• Плиты не обладают хорошей теплостойкостью.
• Цена такого фундамента будет относительно немалой.

Выбор размеров блока ФБС для фундамента

Размер ФБС-блоков подбирается в зависимости от габаритов стен и перекрытий, площади здания, веса сооружения, а также непосредственных характеристик грунта.

Чем менее устойчив грунт, тем больший размер и вес ФБС блоков потребуется. Если дом возводится на глине, то нужны габаритные изделия. Если поверхность достаточно надежна, то размеры бетонных блоков для фундамента могут меньшими. По общему правилу вне зависимости от длины блока ФБС, на одну стену должно приходиться не меньше пяти штук.

Маркировка ФБС

Размеры фундаментных блоков ФБС описываются маркировкой изделия. Все регулируется ГОСТом 13579-78.

Буквенные обозначения при маркировке фундаментных блоков:

• С – использование в качестве основы силикатного бетона.
• П – применение керамзитобетона.
• Т – блок из тяжелого бетона.

На рисунке показано, каким образом зашифрованы в маркировке ФБС размеры и другие параметры.

Бетонные блоки для фундамента: размеры

Рекомендации для покупки ФБС

Перед приобретением материалов необходимо точно рассчитать количество фундаментных блоков и их размеры.

При покупке в обязательно порядке проверяйте, чтобы вес фундаментных блоков соответствовал их габаритам согласно приведенной выше таблице. В случае более низкого веса можно сделать вывод об использовании при производстве не достаточно уплотненного бетона. Такое основание не будет прочным, и покупать такое изделие не следует.

Приобретайте только заводские плиты ФБС. Они проходят необходимый контроль качества. Материалы, изготовленные на кустарном производстве, таят в себе массу неприятных сюрпризов.

Помимо ФБС заводы изготавливают также ФБВ-плиты. Это бетонные блоки разных размеров с заранее заготовленными вырезами для прокладки коммуникаций.

Старые бетонные блоки

Большим преимуществом ФБС является то, что материал практически не подвержен разрушению. В связи с этим нормальной практикой является монтаж фундамента из плит, уже бывших в употреблении. По цене они гораздо выгоднее новых экземпляров. Однако при приобретении очень важен не только такой параметр блока ФБС, как размер, но и его фактическое состояние. Степень пригодности блоков для повторного строительства определяется специалистами.

Размеры и вес фундаментных блоков ФБС по ГОСТу, применение и характеристики

Из названия понятно, что фундаментные блоки  используются для строительства основания здания. Как правило, чаще всего, особенно при индивидуальном строительстве, выбирается ленточный тип фундамента, так как он позволяет оборудовать полноценное подвальное помещение, пригодное к использованию в различных целях. Кроме того, по оценкам специалистов, монтаж фундаментных блоков в среднем обходится на 2 000 руб/м³ дешевле, чем сооружение опалубки и изготовление монолита заливкой бетонного раствора.

Когда целесообразно применять ФБС

• При наличии свободного пространства на строительной площадке. Блоки имеют значительный вес, и их перемещение вручную невозможно. Поэтому придется использовать подъемный кран.
• При дефиците времени. Сборный фундамент монтируется быстро, необходимо лишь подготовить место под закладку блоков. В то же время для сооружения монолитного ленточного основания необходимо возвести ограждение (опалубку), изготовить арматурный «скелет», замесить и залить раствор, принять меры для его подогрева и ждать, когда бетон отвердеет.
• При проведении работ в неблагоприятных погодных условиях (например, осенью, в период интенсивного выпадения осадков), которые затрудняют изготовление фундамента способом заливки.
• При недостаточной квалификации работников. Сооружение монолита требует знаний и опыта, а установка блоков в траншею сложностей не представляет.
• Если по своему исполнению лента будет делаться не сплошной, а прерывистой. Этот вид фундамента дает дополнительную экономию на материалах. 

Характеристики блоков

Такие характеристики фундаментных блоков, как размер и вес, находятся в прямой взаимосвязи. Их изготовление регламентировано Государственными Стандартами. Например, для фундаментных изделий – ГОСТ 13579 от 1978 года.

В соответствии с ним, длина блоков лежит в пределах 0,8 – 2,4 м; ширина 0,3 – 0,5 м; высота 0,3 – 0,6 м. Вес фундаментных блоков – от 340 кг до 2 т.

Все блоки имеют наименование в соответствие с артикулом. Например, изделие 8-3-6 выпускается с такими характеристиками (длина х ширина х высота) в «м» – 0,8 х 0,3 х 0,6. Приблизительная стоимость – 740 руб/шт.

 Понятно, что при таком обозначении цифры в наименовании продукции обозначают ее габариты, выраженные в «дм». Аббревиатура расшифровывается: «Ф» – фундаментный; «Б» – блок; «С» – сплошной.

Например, изделие ФБС 24-5-3 соответствует размерам 2,4 х 0,5 х 0,3 м, имеет вес 800 кг и стоит порядка 920 руб/шт.

В продаже имеются ж/б фундаментные блоки различных производителей. Поэтому могут несколько отличаться как типовыми размерами, так и маркой использованного бетона.

Для М100 (класса 7,5) можно привести такие данные:

• длина – от 78 см до 2,38 м;
• ширина – от 30 до 60 см;
• высота – от 30 или 58 см.
• Вес – от 320 кг до 1,96 т.
• Цена в пределах 445 – 2 670 руб/шт.

Рекомендация

Нужно стараться использовать блоки большей длины. Тогда сократится количество их стыков, снизится объем работ по монтажу, герметизации швов. А если учесть, что придется оплачивать каждый час использования крана, это ощутимо удешевит строительство.

Блоки ФБС, ГОСТ 13579-78 фото

Блоки фундаментные бетонные и железобетонные – это сборные элементы, которые используются в качестве фундаментов при строительстве малоэтажных зданий и сооружений различного назначения. С помощью фундаментных блоков также строятся подземные помещения различной глубины, где блоки выступают в качестве стенок (например, подвальные и цокольные помещения, технические подполья зданий и др.). Поэтому часто они носят название железобетонные блоки стен подвалов.

Жб блоки фундаментные широко применяются для возведения столбчатого или ленточного фундамента – они укладываются по периметру и осевым линиям предполагаемой постройки, создавая прочную основу для будущего здания или сооружения. Стыки между блоками заполняются специальным раствором, обеспечивающим не только необходимую прочность соединения блоков, но и защиту от повреждений, которые могут произойти от воздействия окружающей среды (влажность, смена температуры воздуха, климатические осадки и т.д.).

Бетонные и железобетонные фундаментные блоки и блоки стен подвала используются во многих сферах строительства (например, энергетическое, индустриальное и промышленное строительство). Однако небольшой вес и универсальность блоков позволяет использовать их и в частном строительстве: они не требуют наличия тяжелой техники, поэтому можно в кратчайшие сроки проложить фундамент абсолютно любой площади и конфигурации. Фундаментные блоки могут также использоваться в дорожном строительстве в качестве постоянных или временных барьерных преград на проезжей части автомобильных дорог и в местах, которые не предназначаются для заезда транспорта.

Железобетон, из которого изготавливаются фундаментные блоки, обладает значительными преимуществами перед другими строительными материалами. Высокая прочность бетона изделий позволяет им максимально долго переносить различные нагрузки. Помимо этого, бетон обладает высоким порогом водонепроницаемости, его поверхность не разрушается под действием влаги и активных химических соединений, в избытке содержащихся во влажной среде. Поэтому его применение в качестве материала для изготовления подземных фундаментов вполне обосновано: фундамент из сборных бетонных блоков полностью выполняет свою функцию — восприятие нагрузок от веса здания на его основание и последующее распределение этих нагрузок в грунт.

Фундаментные блоки делятся на несколько типов:

• бетонные и железобетонные блоки ФБС – это сплошные блоки стенного типа, которые используются как фундаментные блоки для укладки ленточного фундамента и как блоки стен подвалов;
• бетонные и железобетонные блоки ФБВ – сплошные блоки, имеющие один или несколько вырезов для укладки перемычек и прокладки инженерных коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев;
• бетонные и железобетонные блоки ФБП – это пустотные блоки с открытыми вниз пустотами, необходимыми для заполнения их дополнительным утеплителем или для омоноличивания связываемых сборных элементов. Применяются, как правило, в неотпаливаемых помещениях.

Стандартный железобетонный фундаментный блок представляет собой прямоугольный параллелепипед, боковые грани которого имеют специальные пазы. При монтаже пазы заливаются гидроизолирующим раствором. Верхняя плоскость фундаментного блока имеет монтажные петли, которые служат для удобства монтажа.

Фундаментные блоки изготавливаются в соответствии с ГОСТ 13579-78 «Блоки бетонные для стен подвалов» из тяжелого, легкого и плотного силикатного бетонов. Класс бетона по прочности на сжатие принимается: от В3,5 до В15 – для блоков из легкого и тяжелого бетонов, В12,5 – для блоков из плотного силикатного бетона. Классы бетона по морозостойкости и водонепроницаемости назначаются в зависимости от проекта, состояния грунта и климатических условий в районе строительства.

Фундаментные блоки, как правило, не армируются. В некоторых случаях блоки имеют арматурные выпуски, например, для установки ленточного фундамента или при строительстве сооружений в нестабильных грунтах: фундаментные блоки и блоки стен подвалов фото жестко связываются между собой и объединяются в единую рамную и более прочную конструкцию. Монтажные петли блоков изготавливаются из стержневой горячекатаной арматуры гладкой класса А-I марок ВСт3пс2 и ВСт3сп2 или периодического профиля Аc-II, марки 10ГТ. Арматуру из стали марки ВСт3пс2 не допускается применять для монтажных петель, предназначенных для подъема и монтажа блоков при температуре ниже -40°С.

В компании ГК «БЛОК» можно не только заказать блоки фундаментные железобетонные, но и проконсультироваться с нашими специалистами, подобрать требуемые конструкции железобетонных изделий. В нашем отделе продаж можно заранее узнать и уточнить цену железобетонных фундаментных блоков и рассчитать общую стоимость заказа. Купить железобетонные фундаментные блоки фото и проконсультироваться по общим вопросам покупки и доставки Вы можете, позвонив по телефонам компании ГК «БЛОК»: Санкт-Петербург: (812) 309-22-09, Москва: (495) 646-38-32, Краснодар: (861) 279-36-00. Режим работы компании: Пн-Пт с 9-00 до 18-00. Компания ГК «БЛОК» осуществляет доставку железобетонных фундаментных блоков по всей России прямо до объекта заказчика или на строительную площадку, если позволяет инфраструктура.

По вопросам монтажа железобетонных фундаментных блоков обращаться по телефону (812) 309-22-09.

Фундаментные блоки (ФБС) от производителя

Фундаментные блоки используются при возведении стен подвалов и элементов ленточных фундаментов. Основное назначение фундаментных блоков — перераспределение всей нагрузки здания на фундамент.

Среди основных преимуществ фундаментных блоков:

• Долговечный
• Надежность
• Высокое качество изделий

Фундаментные блоки сплошного сечения для стен подвала выполнены из тяжелого бетона марки В7,5 и морозостойкости F50.По дополнительному согласованию блоки могут изготавливаться из бетона другой марки.

ПРИМЕНЕНИЕ БЛОКОВ

Фундаментные блоки из бетона — разновидности железобетонных изделий, непосредственным назначением которых является закладка фундамента. Более того, их используют для строительства подвальных помещений, различных перегородок, навесов. Их используют в аграрном секторе, например, при строительстве комплексов. Блоки используются при возведении стен тоннелей. Есть еще несколько способов применения фундаментных блоков: защита дорог, ремонт дорог, рекультивация берегов в случае разрушительных наводнений.Военные используют блоки ФБС для возведения защитных сооружений, заграждений.

ПРЕИМУЩЕСТВА ФУНДАМЕНТОВ

• Экономия времени, так как нет необходимости смешивать бетон и соблюдать пропорции. Установка очень быстрая;
• Прочность конструкции. Некоторые типы могут иметь специальные врезки, укрепляющие конструкцию;
• Блок устойчивы к морозам, кислым почвам подпитываются специальными средствами;
• Специальные крючки позволяют облегчить установку основания.

НЕДОСТАТКИ

• Это дорогой материал. Для его установки вам понадобится строительная техника.
• Есть возможность просадки фундамента. Структура не цельная. Это означает, что каждый блок может вести себя по-разному.

ВИДЫ ФУНДАМЕНТОВ

• бетон силикатный;
• бетон керамзитовый;
• армированный бетон.

При изготовлении силикатного бетона добавляется известь.Раствор будет умеренным по весу. Блоки маркируются буквой S . Вес продукта от 290 кг до 1,7 тонны. Согласно ДСТУ, данный тип нельзя использовать в условиях повышенной влажности, следовательно, нельзя использовать в качестве фундамента.

При изготовлении керамзитобетона в раствор добавляют керамзит (керамзитовый заполнитель). Сам керамзит — это пористый материал. Поэтому эта пропорция самая легкая, вес блока от 250 кг до 1,5 тонны.Товар будет обозначен буквой L , то есть легкий. Низкая цена, высокое водопоглощение и низкая прочность — все это свойственно керамзитобетону. Его можно использовать для строительства легких построек.

Железобетонные блоки имеют большой вес за счет плотности материала. Вес колеблется от 250 кг до 2 тонн. Он отмечен буквой Т, что означает тяжелый. Он предназначен для многоэтажных домов.

Фундаментные блоки различают по форме, профилю, размерам.У них разная маркировка:

• Прямоугольные блоки с ямками называются ФБС. Их используют при устройстве ленточного фундамента, устройстве малоэтажных стен.
• Для монолитного фундамента используются пустотелые блоки. Они помечены как FBP. Блоки используются для строительства многоэтажных домов.
• Могут быть как трапециевидного, так и прямоугольного сечения. Они обозначены как BF.
• Колонны цилиндрические для устройства изолированного фундамента и свайного фундамента.Они имеют маркировку F.
.
• Блоки трапециевидной формы используются для ленточных и опорных фундаментов. Этот продукт отмечен знаком FO.

Цифры после блока — габаритные размеры в дециметрах. Первая цифра означает длину, вторая — ширину, а последняя — высоту.

Фетальная бычья сыворотка — FBS

Сывороточные добавки Среды для культивирования клеток

Среда для культивирования клеток in vitro поддерживает размножение клеток в лаборатории или на производстве. Среды бывают жидкими или порошкообразными, которые перед использованием необходимо увлажнить и стерилизовать. В случаях, когда компоненты животного происхождения не вызывают беспокойства, в базальные среды для культивирования клеток часто добавляют сыворотку, которая действует как источник факторов роста, альбуминов и других компонентов, способствующих устойчивому росту клеток. Варианты сывороток включают FBS, бычью телячью сыворотку и разработанные альтернативы сыворотке / сыворотке.

Преимущества фетальной бычьей сыворотки

Добавленная в концентрации от 5% до 10%, эмбриональная бычья сыворотка обеспечивает питательные вещества, факторы прикрепления и другие компоненты для клеток, включая фибробласты, в системах культивирования.Сыворотка также действует как буфер против колебаний pH. Он имеет высокий уровень факторов стимулирования роста, таких как макромолекулярные белки и белки-носители, которые максимизируют рост клеток. Поскольку FBS получают из плода, в нем естественно мало антител. По этим причинам это наиболее распространенная категория используемых сывороток.

Часто задаваемые вопросы о FBS

Вот ответы на некоторые частые вопросы, касающиеся FBS.

Из чего состоит ФБС?

Фетальная бычья сыворотка содержит множество пищевых и макромолекулярных факторов, таких как аминокислоты, липиды и сахара.Он имеет очень низкий уровень антител и высокий уровень факторов роста для оптимизации процессов культивирования клеток. Поскольку FBS не является полностью определенным компонентом среды, состав может отличаться от партии к партии. Он может включать более 1000 компонентов.

Какие типы продуктов FBS?

Существует множество типов продуктов фетальной бычьей сыворотки, которые различаются в зависимости от источника, обработки и тестирования. Cytiva предлагает широкий спектр продуктов FBS, прошедших стерильную фильтрацию и прошедших проверку качества, для удовлетворения различных требований.Каждую партию сыворотки объединяют после фильтрации и перед распределением. Этот этап, называемый настоящей обработкой пула, обеспечивает однородность и согласованность бутылок. И это увеличивает консистенцию и качество наших сывороточных продуктов. Наш FBS получен из крови, полученной в разных странах, при этом большинство продуктов поступает из Соединенных Штатов. Выделяют три основные категории:

• Определенный FBS: для пользователей, обеспокоенных уровнем эндотоксинов. Эти сыворотки, полученные из США, фильтруются через фильтры 40 нм и имеют уровни эндотоксина ≤ 10 EU / мл.
• Характеризованный FBS: для пользователей, обеспокоенных возможностью занесения губчатого энцефалита крупного рогатого скота (BSE) в культуру их клеток. Эти продукты поступают из Новой Зеландии и Австралии.
• Стандартный FBS: обычно используется в исследовательских приложениях для роста обычных типов клеток.

Другие типы продуктов фетальной бычьей сыворотки включают:

• Специальные продукты, такие как диализованный FBS и FBS, прошедший импортные испытания USDA
• Продукты, прошедшие скрининг, такие как FBS, скрининг эмбриональных стволовых клеток и скрининг клеток насекомых, для конкретных применений в культуре клеток

Общие применения FBS в культуре клеток

Фетальная бычья сыворотка используется для in vitro культуры эукариотических клеток в:

• Производство вакцин
• Биотехнологические исследования и производство
• Исследование стволовых клеток
• Диагностика животных
• Биофармацевтические препараты

Широкоформатный ресивер

| Руководство по позиционированию в футболе

Физические измеримые параметры:

• Высота: 6’2 «
• Вес: 190 фунтов.

Статистика:

• 40 ярдов: 4.5
• Скамья: 235 фунтов.
• Приседания: 315 фунтов.

Ключи от автобуса:

Должен быть постоянной угрозой каждый раз, когда он находится на поле. Должен иметь мгновенное освобождение от прямой видимости с низким уровнем площадки и небольшим бесполезным движением, рывком по маршруту, срезанием на один шаг, безупречной ловкостью и способностью отделиться от защитников с редкой максимальной скоростью и неуловимостью.Он должен уметь ловить спорной мяч так же легко, как столб, неглубокий, наклонный или запутанный. Он должен комфортно бегать по всем маршрутам, обладать редкими навыками владения мячом, иметь отличное сочетание размера и скорости, а также готовность блокировать. Он многолетний игрок штата, а в некоторых случаях — всеамериканец.

---

Физические измеримые параметры:

• Высота: 6’0 «
• Вес: 175 фунтов.

Статистика:

• 40 ярдов: 4.6
• Скамья: 225 фунтов.
• Приседания: 295 фунтов.

Ключи от автобуса:

Должен иметь мгновенный выход из зоны прямой видимости с низким уровнем площадки, рывком по маршруту, срезанием на один шаг, выдающейся ловкостью и способностью отделяться от защитников своей скоростью. Он должен уметь ловить спорной мяч так же легко, как сетку, уклон или заминку. Он должен комфортно бегать по всем маршрутам, обладать очень хорошими навыками владения мячом и готовностью блокировать.Он получил награды Общегосударственного и Всеконференционного.

---

Физические измеримые параметры:

• Высота: 5’10 «
• Вес: 165 фунтов.

Статистика:

• 40 ярдов: 4.6
• Скамья: 205 фунтов.
• Приседания: 275 фунтов.

Ключи от автобуса:

Должен иметь быстрое освобождение от прямой видимости, хорошее зрение и инстинкты, хорошие руки, скорость, чтобы защитники промахнулись.Он, как правило, очень атлетичен, быстрее, чем быстр, или обладает скоростью, и он слишком мал для этой позиции. Он готов блокировать и играет с большим мотором. Он получил почетные звания всех конференций.

---

Физические измеримые параметры:

• Высота: 5’8 «
• Вес: 150 фунтов.

Статистика:

• 40 ярдов: 4,7
• Скамья: 200 фунтов.
• Приседания: 265 фунтов.

Ключи от автобуса:

Должен уметь быстро выходить из строя, продавать маршрут игры, делать точные врезки в / из брейков, постоянно ловить мяч и, как правило, быстрее, чем быстро.У него должен быть как минимум 1 год студенческого футбольного опыта.

Блок предохранителей

GLOSO с общей горячей подачей, одиночный стержень FBS, предохранитель / блок автоматического выключателя с одной цепью питания (10P): Automotive

---

Цена:

17 долларов.32 + Без залога за импорт и $ 14,47 за доставку в Российскую Федерацию Подробности

• Убедитесь, что это подходит введя номер вашей модели.
• GLOSO FBS Одиночная шпилька, панель предохранителя одинарной цепи питания — 1 упаковка
• Позиции: 10 цепей (совместимость с ATO и ATC)
• Входная клемма: 150 А, макс. № 10-32 резьбовые шпильки (рекомендуемый размер провода № 4-6 AWG)
• Выходная клемма: 30 А макс. На цепь (рекомендуемый размер провода # 12-16 AWG)
• Черный UL94V0 из термопласта, клеммы контроля качества 0,250 «x 0,032»

› См. Дополнительные сведения о продукте Блок предохранителей

GLOSO с общей горячей подачей, одиночный стержень FBS, блок предохранителей / выключателей с одинарной цепью питания (12P): Automotive

---

Цена:

19 долларов.85 + Депозит без импортных пошлин и доставка в Россию $ 14,68 Подробности

• Убедитесь, что это подходит введя номер вашей модели.
• GLOSO FBS Одиночная шпилька, панель предохранителя одинарной цепи питания — 1 упаковка
• Позиции: 12 цепей (совместимость с ATO и ATC)
• Входная клемма: 150 А, макс. № 10-32 резьбовые шпильки (рекомендуемый размер провода № 4-6 AWG)
• Выходная клемма: 30 А макс. На цепь (рекомендуемый размер провода # 12-16 AWG)
• Черный UL94V0 из термопласта, клеммы контроля качества 0,250 «x 0,032»

› См. Дополнительные сведения о продукте

Блокирующий ICC / IF: Novus Biologicals

Ссылки по теме Выбор флуорохромов для многоцветного ICC / IF Подготовка образцов для экспериментов ICC / IF Фиксация и стабилизация Блокировка для анализа ICC-IF Отбор антител в ICC / IF Методы обнаружения ICC IF Контроли для экспериментов ICC / IF Противокрашивание и монтаж Полезные ссылки Многоцветный протокол ICC / IF Поиск и устранение неисправностей ICC / IF Вторичные антитела Маркер для органелл Посмотреть все протоколы Справочник ICC

Какова цель блокирующего шага в ICC / IF? В ICC / IF обнаружение антигена зависит от специфического связывания антитела с его эпитопом.Это связывание, в свою очередь, регулируется гидрофобными взаимодействиями, ионными взаимодействиями, водородными связями и другими межмолекулярными силами. Помимо облегчения специфического связывания антиген-антитело, те же силы / связи притяжения также могут способствовать неспецифическому связыванию. Этап блокировки сводит к минимуму неспецифические взаимодействия, которые приводят к фоновому и ложноположительному окрашиванию (артефактам). Важно использовать реагенты и условия блокирования, которые снижают неспецифическое связывание, но при этом оказывают незначительное влияние на специфическое связывание антиген-антитело. Каковы наиболее важные аспекты блокирования буферов? Блокирующий буфер должен содержать инактивированную нагреванием нормальную сыворотку того же вида, что и хозяин вторичного антитела. Другие, менее предпочтительные блокирующие агенты включают фетальную телячью сыворотку (FCS), бычий сывороточный альбумин (BSA), казеиновый белок, обезжиренное сухое молоко и желатин. Чтобы облегчить проникновение в клетку и минимизировать эффекты неспецифических гидрофобных взаимодействий, важно добавить неионный детергент (Triton X-100 или Tween 20) в блокирующий буфер, разбавитель антител и промывочные буферы.Блокирующие буферы обычно содержат 1X PBS с 0,1% Triton X-100 (PBS-T). Чтобы уменьшить неспецифические ионные взаимодействия, мы рекомендуем увеличить ионную силу фиксатора и / или разбавителя антител. Однако это не рекомендуется для буферов, содержащих моноклональные антитела, которые распознают единственный эпитоп, поскольку это может отрицательно повлиять на аффинность связывания Состав блокирующих буферов Блокирующий агент Примечания для пользователя Нормальная сыворотка Сыворотка обычно разбавляется до конечной концентрации 5-10% в PBS-T.При непрямом обнаружении сыворотка должна быть из того же вида, что и хозяин вторичного антитела, или в случае прямого обнаружения может использоваться козья сыворотка. BSA BSA обычно растворяют до конечной концентрации 1-5% в PBS-T. Важно использовать БСА, свободный от эндогенных молекул IgG, поскольку они имеют тенденцию перекрестно реагировать со вторичными антителами и вызывать усиление фонового сигнала. Сухое молоко Сухое обезжиренное молоко растворяют в PBS-T до конечной концентрации 1%. Блокирование с помощью молока не рекомендуется для обнаружения фосфорилированных белков из-за высокого содержания фосфопротеинов, которые могут мешать окрашиванию и способствовать высокофоновому окрашиванию.

Внеклеточные небольшие некодирующие РНК загрязнители в фетальной бычьей сыворотке и бессывороточных средах

FBS

FBS был получен от двух разных поставщиков, подробные сведения о продукте описаны в таблице 1.FBS, полученный от Sigma, был обозначен как FBS-1, а от Gibco — как FBS-2.

Препараты FBS с обедненным EV

FBS с обедненным EV получали как из FBS-1, так и из FBS-2. Ультрацентрифугирование и ультрафильтрация использовались для удаления EV из FBS. Получение UC-dFBS и UF-dFBS из обычной FBS проводили в соответствии с Корниловым и др. . ⁹ . Вкратце, UC-dFBS был приготовлен с помощью 19-часового UC обычного FBS при 26000 об / мин (121896 г _макс ) с ротором SW28 (k-фактор 284.7, Beckmann-Coulter). Светлый верхний слой супернатанта фильтровали через фильтр 0,22 мкм (Millipore Stericup-GP, 0,22 мкм, полиэфирсульфоновый фильтр). UF-dFBS получали центрифугированием обычного FBS в течение 55 мин при 3000 g в центробежных фильтрах Amicon ultra-15 (ссылка: UFC910024, 100 кДа Merck Millipore Ltd., Tullagreen, Carrigtwohill, Co. Корк, Ирландия) и сбора потока -через. FBS-1, UC-dFBS-1 и UF-dFBS-1 относятся к FBS, полученному от Sigma, и FBS-2, UC-dFBS-2 и UF-dFBS-2 относятся к FBS, полученному от Gibco (Таблица 1).В качестве контроля использовали коммерчески доступный обедненный ЭВ FBS (Exo-FBS ™, System Biosciences, EXO-FBS, Маунтин-Вью, Калифорния, США), обозначенный как SBI-dFBS (Таблица 1). Блок-схема дизайна исследования представлена ​​на рис. 7.

Рисунок 7

Блок-схема дизайна исследования. FBS с обедненным EV получали ультрацентрифугированием, ультрафильтрацией или закупали у коммерческого поставщика. Подробный протокол приготовления обедненной ЭВ FBS описан в разделе «Материалы и методы». EV, экстрагированные ультрацентрифугированием из 10 мл FBS, обедненного EV FBS и коммерчески определенных сред, характеризовали NTA, TEM и WB.Для секвенирования малых нкРНК ЭВ и РНК экстрагировали с помощью набора exoRNeasy Serum / Plasma Maxi Kit (Qiagen) из 3,5 мл среды, содержащей 10% обедненного FBS. Считывания были картированы как в геном крупного рогатого скота, так и человека, и были идентифицированы небольшие нкРНК, полученные из среды.

Определенная среда

StemPRO ^® Среда MSC SFM, полностью определенный состав среды для культивирования мезенхимальных стволовых клеток, была использована в качестве контроля культуральной среды, не содержащей сыворотки и ксенонов. Информацию о добавках сред см. В таблице 1. Выделение

EV из препаратов FBS и определенных сред

Определение характеристик

EV было выполнено на EV, выделенных UC из-за технических проблем, связанных с использованием exoRNeasy Serum / Plasma Maxi Kit (Qiagen), используемого для исследования секвенирования. .Эта проблема была описана в нашей предыдущей статье ²⁷ Вкратце, ЭВ были выделены из 10 мл FBS, UC-dFBS, UF-dFBS, SBI-dFBS и StemPRO путем ультрацентрифугирования в течение 2 часов при 26000 об / мин (121 896 gmax, SW28, 4 ° C) для сбора осадка EV, который промывали фильтрованным DPBS (фильтр 0,1 мкм) и хранили в микроцентрифужных пробирках Protein LoBind (Eppendorf) при -80 ° C. Для секвенирования малых нкРНК ЭВ и РНК выделяли из 3,5 мл FBS, UC-dFBS, UF-dFBS, SBI-dFBS и StemPRO с помощью набора exoRNeasy Serum / Plasma Maxi (Qiagen).

Анализ слежения за наночастицами

Количество и распределение частиц по размерам в образцах EV были проанализированы с использованием NTA (Nanosight LM14, NanoSight Technology, Солсбери, Великобритания, http://www.malvern.com), как описано ранее ⁹ . Вкратце, изолированные EV разводили в фильтрованном (0,1 мкм) DPBS для получения оптимальной концентрации обнаружения 10 ⁶ –10 ⁹ частиц / мл, и записывали видео в трех экземплярах. Данные были проанализированы с использованием программного обеспечения NTA ²⁸ .

Просвечивающая электронная микроскопия

Морфологию частиц исследовали с использованием ПЭМ, как описано ранее ^9,28 . Вкратце, изолированные EV разводили в фильтрованном (0,1 мкм) DPBS, загружали в медные сетки 200 меш и отрицательно окрашивали нейтральным уранилацетатом и заключали в смесь уранилацетата метилцеллюлозы.

Вестерн-блоттинг

WB выполняли, как описано ранее ⁹ , с использованием первичных антител против рецептора против трансферрина / CD71-H68.4 (# 13-6800, Thermofisher Scientific) в разведении 1: 1000 и ApoA1 ^29,30 (любезный подарок от Матти Джаухиайнена) в соотношении 1: 2000 EV, выделенные ультрацентрифугированием из равных объемов (20 мл) каждого образца, загружали в гели. В качестве контроля использовали белок из лизатов мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани. Образцы денатурировали при 95 ° C в течение 5 минут в восстанавливающем буфере для образцов Лэммли, разделяли с использованием 12% градиентного SDS-PAGE геля Mini-PROTEAN ^® TGX ^™ (№ 456-1043, Bio-Rad) с предварительно окрашенным белковым маркером BlueSTAR. (# MWP03, Nippon Genetics Europe GmbH) в качестве стандарта.Условия работы были 150 В в течение 60 минут. Блоттинг включал полусухой перенос белков на нитроцеллюлозные мембраны, 0,2 мкм (№ 162-0112, Bio-Rad), с использованием 40 мА на гель в течение 60 минут. Блокирование и инкубацию антител проводили в блокирующем буфере Odyssey (PBS) (# 927-40000, LI-COR) с 0,1% Tween-20 и без него, соответственно. После инкубации первичного антитела в течение ночи при +4 ° C мембраны промывали 4 × 5 минут в TBS-T и зондировали вторичным IRDye® 800CW Goat (# 925-32210, LI-COR) при 1:15 000 и козьим антителом против кролика ( # 925-32210, LI-COR) при 1: 10000 в течение 1 часа при комнатной температуре (RT).После инкубации мембраны промывали 4 × 5 минут в TBS-T при комнатной температуре и кратковременно промывали PBS 1X, затем визуализировали на Odyssey FC Imager (LI-COR).

Секвенирование малой некодирующей РНК (малая нкРНК)

Секвенирование малой нкРНК было выполнено Qiagen (Qiagen, Hilden, Германия). EV и РНК выделяли с использованием набора exoRNeasy Serum / Plasma Maxi Kit. EV выделяли из 3,5 мл среды с последующим протоколом выделения РНК, оптимизированным для сыворотки / плазмы (РНК-носитель не добавлялась). Подготовка библиотеки осуществлялась с использованием набора QIAseq miRNA Library Kit.Из 12 мкл выделенной РНК 5 мкл были преобразованы в библиотеки микроРНК NGS. Адаптеры, содержащие уникальные молекулярные индексы (UMI) длиной 12 нт, были лигированы с РНК. Затем РНК преобразовали в кДНК. КДНК амплифицировали с помощью ПЦР (22 цикла) и во время ПЦР добавляли индексы. После ПЦР образцы очищали. Контроль качества подготовки библиотеки выполнялся с использованием либо Bioanalyzer 2100 (Agilent), либо TapeStation 4200 (Agilent). На основании качества вставок и измерений концентрации библиотеки объединяли в эквимолярных соотношениях.Пул библиотек количественно оценивали с использованием набора qPCR ExiSEQ LNA ™ Quant (Exiqon). Затем пулы библиотек секвенировали на приборе для секвенирования NextSeq500 в соответствии с инструкциями производителя с использованием считываний 1 × 75 п.н. Необработанные данные были демультиплексированы, и файлы FASTQ для каждого образца были созданы с использованием программного обеспечения bcl2fastq (Illumina Inc.).

Анализ данных

Коррекция и обрезка UMI

Для исправления смещения ПЦР с помощью информации UMI необработанные считывания обрабатывались следующим образом: Во-первых, cutadapt 1.11 ³¹ использовалось при каждом необработанном чтении с последовательностью адаптера для получения информации о наличии адаптера. Были сохранены только чтения, которые удовлетворяли следующим критериям: (1) чтение содержало адаптеры, (2) чтение имело длину последовательности вставки не менее 16 нт и (3) чтение имело последовательность UMI длиной не менее 10 нт. Во-вторых, вставочные последовательности с неполной последовательностью UMI были извлечены как частичные чтения UMI. В-третьих, все уникальные комбинации вставка + UMI были идентифицированы при чтении с полноразмерным UMI и свернуты в одно чтение.В-четвертых, были объединены свернутые чтения полноразмерного UMI и частичные чтения UMI. После коррекции UMI чтения были обрезаны с использованием вывода cutadapt и собственного скрипта.

Картирование

Считываний картировали с использованием Bowtie 2 (2.2.2) ³² следующим образом: во-первых, считывания отображались на шипы или не картировались (отображались на адапторные последовательности, гомополимеры полиА и полиС или многочисленные последовательности рибосомных или митохондриальных РНК. ) были отфильтрованы. Требовалось полное соответствие эталонной последовательности. Во-вторых, чтения были сопоставлены со зрелыми последовательностями miRBase 20, что потребовало точных совпадений.В-третьих, неотмеченные считывания были сопоставлены либо с эталонным геномом GRCh47 человека, либо с бычьим UMD3, допуская одно несоответствие в первых 32 основаниях считывания. Считывания, выровненные с известными локусами miRNA в геноме, были объединены с картированными miRBase считываниями, а считывания, выровненные с небольшими участками ncRNA в базе данных малых ncRNA Exiqon, были классифицированы как small ncRNA. Картирование считываний в эталонный геном за пределами миРНК или небольших областей нкРНК было классифицировано как картирование генома. Никакие инделки не допускались ни на одном из этапов сопоставления.

Статистический анализ

Счетчики считывания были нормализованы с использованием внешних всплесков (UniSp100 – UniSp151), которые присутствовали в трех относительных концентрациях 0,1 (низкая), 1 (умеренная) и 5 ​​(высокая), что отражает ожидаемый диапазон miRNA. в образцах. Линейные функции с фиксированной точкой отсечки на нуле были приспособлены к концентрации всплеска по сравнению с наблюдаемыми счетами в каждом образце. Линейная аппроксимация была использована для расчета расчетной относительной концентрации для каждой РНК. Для анализа кластеризации были включены только РНК с умеренным (> 1) нормализованным количеством пиков по крайней мере в одном образце.Кластерный анализ был выполнен для списков miRNA и малых ncRNA, которые включали 60 самых распространенных miRNA и 40 самых распространенных малых ncRNA во всех образцах. Метрика евклидова расстояния и средняя связь использовались в неконтролируемом кластерном анализе. Диаграммы Эйлера были созданы с использованием порогового значения 1 нормализованного количества пиков (от среднего до высокого) с использованием пакета eulerr в R.

Идентификация обычно регистрируемых miRNA

Для идентификации наиболее часто регистрируемых EV miRNA в исследованиях клеточных культур мы использовали Базы данных EVpedia ³³ и miRandola ³⁴ .Были включены исследования с использованием культивированных клеток человека. В miRandola были включены только исследования с материалом экзосом или микровезикул. Это привело к 19 включенным исследованиям в EVpedia и 10 исследованиям в miRandola.