Фбс размеры гост: Блоки фундаментные ФБС ГОСТ 13579-78 — foamin.ru

Содержание

ГОСТ 13579-78 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия / 13579 78

ГОСТ 13579-78

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

БЛОКИ БЕТОННЫЕ
ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ

Технические условия

Москва
Стандартинформ
2005

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

БЛОКИ БЕТОННЫЕ ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ

Технические условия

Concrete blocks for walls of basements. Specifications

ГОСТ
13579—78

Дата введения 01.01.79

Настоящий стандарт распространяется на блоки, изготовляемые из тяжелого бетона, а также керамзитобетона и плотного силикатного бетона средней плотности (в высушенном до постоянной массы состоянии) не менее 1800 кг/м³ и предназначаемые для стен подвалов и технических подпольев зданий.

Сплошные блоки допускается применять для фундаментов.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

1.1. Блоки подразделяют на три типа:

ФБС — сплошные;

ФБВ — сплошные с вырезом для укладки перемычек и пропуска коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев;

ФБП — пустотные (с открытыми вниз пустотами).

1.2. Форма и размеры блоков должны соответствовать указанным на черт. 1 — 3 и в табл. 1.

Блоки типа ФБС

Блоки шириной 300 мм

Черт. 1

Блоки шириной 400, 500 и 600 мм

Черт. 1 (продолжение)

Блоки типа ФБВ

Черт. 2

Блоки типа ФБП

Черт. 3

Таблица 1

Тип блока	Основные размеры блока, мм
Тип блока	Длина l	Ширина b	Высота h
ФБС	2380	300; 400; 500; 600	580
	1180	400; 500; 600	280; 580
	880	300; 400; 500; 600	580
ФБВ	880	400; 500; 600
ФБП	2380	400; 500; 600

1.3. Структура условного обозначения (марок) блоков следующая:

Пример условного обозначения блока типа ФБС длиной 2380 мм, шириной 400 мм и высотой 580 мм, из тяжелого бетона:

ФБС24.4.6-Г ГОСТ 13579-78

То же, типа ФБВ длиной 880 мм, шириной 400 мм и высотой 580 мм, из бетона на пористых заполнителях (керамзитобетона):

ФБВ9.4.6-П ГОСТ 13579-78

То же, типа ФБП длиной 2380 мм, шириной 500 мм и высотой 580 мм, из плотного силикатного бетона:

ФБП24.5.6-С ГОСТ 13579-78

Примечание. Допускается изготовление и применение блоков длиной 780 мм (доборных), принятых в утвержденных до 01.01.78 типовых проектах зданий, на время действия этих проектов.

1.4. Марки и характеристики блоков из тяжелого бетона приведены в табл. 2, из керамзитобетона — в табл. 3, из плотного силикатного бетона — в табл. 4.

При соответствующем обосновании допускается применение блоков из бетона с классами по прочности на сжатие, отличающимися от указанных в табл. 2 — 4. При этом во всех случаях класс бетона по прочности на сжатие должен приниматься не более В15 и не менее:

В3,5 — для блоков из тяжелого бетона и керамзитобетона;

В12,5 « « « плотного силикатного бетона.

Примечание. В условное обозначение блоков из бетона классов по прочности на сжатие, отличающихся от указанных в табл. 2 — 4, должен вводиться соответствующий цифровой индекс перед буквой, характеризующей вид бетона.

Таблица 2

Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Монтажная петля		Расход материалов		Масса блока (справочная), т
Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Марка	Кол.	Бетон, м³	Сталь, кг	Масса блока (справочная), т
ФБС24.3.6-Т	В7,5	П2а	2	0,406	1,46	0,97
ФБС24.4.6-Т		П2а		0,543	1,46	1,30
ФБС24.5.6-Т		П3		0,679	2,36	1,63
ФБС24.6.6-Т		П3		0,815	2,36	1,96
ФБС12.4.6-Т		П2		0,265	1,46	0,64
ФБС12.5.6-Т				0,331		0,79
ФБС12.6.6-Т				0,398		0,96
ФБС12.4.3-Т		П4		0,127	0,74	0,31
ФБС12.5.3-Т				0,159		0,38
ФБС12.6.3-Т				0,191		0,46
ФБС9.3.6-Т		П1		0,146	0,76	0,35
ФБС9.4.6-Т				0,195		0,47
ФБС9.5.6-Т				0,244		0,59
ФБС9.6.6-Т		П2		0,293	1,46	0,70
ФБВ9.4.6-Т		П1		0,161	0,76	0,39
ФБВ9.5.6-Т				0,202		0,49
ФБВ9.6.6-Т				0,243		0,58
ФБП24.4.6-Т	В12,5	П2		0,439	1,46	1,05
ФБП24.5.6-Т				0,526		1,26
ФБП24.6.6-Т				0,583		1,40

Примечание. Масса блоков приведена для тяжелого бетона средней плотностью 2400 кг/м³.

Таблица 3

Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Монтажная петля		Расход материалов		Масса блока (справочная), т
Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Марка	Кол.	Бетон, м³	Сталь, кг	Масса блока (справочная), т
ФБС24.3.6-П	В7,5	П2а	2	0,406	1,46	0,73
ФБС24.4.6-П				0,543		0,98
ФБС24.5.6-П				0,679		1,22
ФБС24.6.6-П	В7,5	П3	2	0,815	2,36	1,47
ФБС12.4.6-П		П1		0,265	0,76	0,48
ФБС12.5.6-П		П2		0,331	1,46	0,60
ФБС12.6.6-П		П2		0,398	1,46	0,72
ФБС12.4.3-П		П4		0,127	0,74	0,23
ФБС12.5.3-П				0,159		0,29
ФБС12.6.3-П				0,191		0,35
ФБС9.3.6-П		П1		0,146	0,76	0,26
ФБС9.4.6-П				0,195		0,35
ФБС9.5.6-П				0,244		0,44
ФБС9.6.6-П				0,293		0,53
ФБВ9.4.6-П				0,161		0,29
ФБВ9.5.6-П				0,202		0,37
ФБВ9.6.6-П				0,243		0,44
ФБП24.4.6-П	В12,5	П2		0,439	1,46	0,79
ФБП24.5.6-П				0,526		0,95
ФБП24.6.6-П				0,583		1,05

Примечание. Масса блоков, а также марка монтажных петель приведены для блоков из керамзитобетона средней плотностью 1800 кг/м³.

Таблица 4

Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Монтажная петля		Расход материалов		Масса блока (справочная), т
Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Марка	Кол.	Бетон, м³	Сталь, кг	Масса блока (справочная), т
ФБС24.3.6-С	В15	П2а	2	0,406	1,46	0,81
ФБС24.4.6-С				0,543		1,09
ФБС24.5.6-С				0,679		1,36
ФБС24.6.6-С		П3		0,815	2,36	1,63
ФБС12.4.6-С		П1		0,265	0,76	0,53
ФБС12.5.6-С		П2		0,331	1,46	0,66
ФБС12.6.6-С		П2		0,398	1,46	0,80
ФБС12.4.3-С		П4		0,127	0,74	0,25
ФБС12.5.3-С				0,159		0,32
ФБС12.6.3-С				0,191		0,38
ФБС9.3.6-С		П1		0,146	0,76	0,29
ФБС9.4.6-С				0,195		0,39
ФБС9.5.6-С				0,244		0,49
ФБС9.6.6-С				0,293		0,59
ФБВ9.4.6-С				0,161		0,32
ФБВ9.5.6-С				0,202		0,40
ФБВ9.6.6-С				0,243		0,49
ФБП24.4.6-С		П2		0,439	1,46	0,88
ФБП24.5.6-С				0,526		1,05
ФБП24.6.6-С				0,583		1,17

Примечание. Масса блоков, а также монтажных петель приведена для блоков из плотного силикатного бетона средней плотностью 2000 кг/м³.

1.5. Расположение монтажных петель в блоках должно соответствовать указанному на черт. 1 — 3. Конструкции монтажных петель приведены в приложении.

Допускается устанавливать монтажные петли в блоках типа ФБС длиной 1180 и 2380 мм на расстоянии 300 мм от торцов блока и заподлицо с его верхней плоскостью.

При применении для подъема и монтажа блоков специальных захватных устройств допускается, по согласованию изготовителя с потребителем и проектной организацией, изготовление блоков без монтажных петель.

1.4, 1.5. (Измененная редакция, Изм. № 1).

2.1. Материалы, применяемые для приготовления бетона, должны обеспечивать выполнение технических требований, установленных настоящим стандартом, и соответствовать действующим стандартам или техническим условиям на эти материалы.

2.2. Фактическая прочность бетона блоков (в проектном возрасте и отпускная) должна соответствовать требуемой, назначаемой по ГОСТ 18105 в зависимости от нормируемой прочности бетона, указанной в проектной документации на здание или сооружение, и от показателей фактической однородности прочности бетона.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

2.3. Морозостойкость и водонепроницаемость бетона должны назначаться в проекте в зависимости от режима эксплуатации конструкций и климатических условий района строительства согласно СНиП 2.03.01 для тяжелого бетона и керамзитобетона и СН 165 для плотного силикатного бетона.

2.4. Бетон, а также материалы для приготовления бетона блоков, предназначенных для применения в условиях воздействия агрессивной среды, должны удовлетворять требованиям СНиП 2.03.11, а также дополнительным требованиям СН 165 для блоков из плотного силикатного бетона.

2.5. Классы бетона по прочности на сжатие, марки бетона по морозостойкости и водонепроницаемости, а при необходимости и требования к бетону и к материалам для его приготовления (см. п. 2.4), должны соответствовать проектным, указываемым в заказах на изготовление блоков.

2.6. Поставка блоков потребителю должна производиться после достижения бетоном требуемой отпускной прочности (п. 2.2).

2.7. Значение нормируемой отпускной прочности бетона блоков в процентах от класса по прочности на сжатие следует принимать равным:

50 — для тяжелого бетона и керамзитобетона класса В 12,5 и выше;

70 » » » класса В 10 и ниже;

80 » керамзитобетона » В 10 » »

100 » плотного силикатного бетона.

При поставке блоков в холодный период года допускается повышать значение нормируемой отпускной прочности бетона в процентах от класса по прочности на сжатие, но не более:

70 — для бетона класса В 12,5 и выше;

90 » » » В 10 и ниже.

Значение нормируемой отпускной прочности бетона следует принимать по проектной документации на конкретное здание или сооружение в соответствии с требованиями ГОСТ 13015.

Поставку блоков с отпускной прочностью бетона ниже прочности, соответствующей его классу по прочности на сжатие, производят при условии, если изготовитель гарантирует достижение бетоном блоков требуемой прочности в проектном возрасте, определяемой по результатам испытания контрольных образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава и хранившихся в условиях согласно ГОСТ 18105.

2.5 — 2.7. (Измененная редакция, Изм. № 1).

2.8. При отпуске блоков потребителю влажность керамзитобетона не должна быть более 12 %.

2.9. Монтажные петли блоков должны изготовляться из стержневой горячекатаной арматуры гладкой класса A-I марок ВСт3пс2 и ВСт3сп2 или периодического профиля Ас-II марки 10ГТ по ГОСТ 5781.

Арматуру из стали марки ВСт3пс2 не допускается применять для монтажных петель, предназначенных для подъема и монтажа блоков при температуре ниже минус 40 °C.

2.10. Отклонения в миллиметрах размеров блоков не должны превышать:

по длине………………………………………………………………………………………… ± 13

по ширине и высоте………………………………………………………………………. ± 8

по размерам вырезов……………………………………………………………………… ± 5

2.11. Отклонение от прямолинейности профиля поверхностей блока не должно превышать 3 мм на всю длину и ширину блока.

2.12. Устанавливают следующие категории бетонной поверхности блоков:

A3 — лицевой, предназначенной под окраску;

А5 — лицевой, предназначенной под отделку керамическими плитками, укладываемыми по слою раствора;

А6 — лицевой неотделываемой;

А7 — нелицевой, невидимой в условиях эксплуатации.

Требования к качеству поверхностей блоков — по ГОСТ 13015.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

2.13. (Исключен, Изм. № 1).

2.14. В бетоне блоков, принимаемых согласно разд. 3, не допускаются трещины, за исключением местных поверхностных усадочных, ширина которых не должна превышать 0,1 мм в блоках из тяжелого и плотного силикатного бетона и 0,2 мм в блоках из керамзитобетона.

2.15. Монтажные петли должны быть очищены от наплавов бетона.

3.1. Приемку блоков следует проводить партиями в соответствии с требованиями ГОСТ 13015 и настоящего стандарта.

3.2. Приемку блоков по морозостойкости и водонепроницаемости бетона, отпускной влажности керамзитобетона, а также по водопоглощению бетона блоков, предназначенных для эксплуатации в среде с агрессивной степенью воздействия, следует проводить по результатам периодических испытаний.

3.3. Испытания бетона на водонепроницаемость и водопоглощение блоков, к которым предъявляют эти требования, следует проводить не реже одного раза в 3 мес.

3.4. Отпускную влажность керамзитобетона следует контролировать не реже одного раза в месяц по результатам испытания проб, отобранных из трех готовых блоков.

Оценку фактической отпускной влажности следует проводить по результатам проверки каждого контролируемого блока по среднему значению влажности отобранных из него проб.

3.5. Приемку блоков по показателям прочности бетона (классу бетона по прочности на сжатие и отпускной прочности), соответствия монтажных петель требованиям настоящего стандарта, точности геометрических параметров, ширины раскрытия технологических трещин и категории бетонной поверхности блоков следует проводить по результатам приемосдаточных испытаний.

3.6. Приемку блоков по показателям точности геометрических параметров, категории бетонной поверхности и ширины раскрытия технологических трещин следует осуществлять по результатам одноступенчатого выборочного контроля.

3.7. Приемку блоков по наличию монтажных петель, правильности нанесения маркировочных надписей и знаков следует проводить путем сплошного контроля с отбраковкой блоков, имеющих дефекты по указанным показателям.

Разд. 3. (Измененная редакция, Изм. № 1).

4.1. Прочность бетона на сжатие следует определять по ГОСТ 10180 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава и хранившихся в условиях, установленных ГОСТ 18105.

При испытании блоков неразрушающими методами фактическую отпускную прочность бетона на сжатие следует определять ультразвуковым методом по ГОСТ 17624 или приборами механического действия по ГОСТ 22690, а также другими методами, предусмотренными стандартами на методы испытания бетона.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

4.2. (Исключен, Изм. № 1).

4.3. Марка бетона по морозостойкости должна контролироваться в соответствии с ГОСТ 10060.0 - ГОСТ 10060.4.

4.4. Водонепроницаемость бетона блоков следует определять по ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.5 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

4.4.1. (Исключен, Изм. № 1).

4.5. Водопоглощение бетона блоков, предназначенных для применения в условиях воздействия агрессивной среды, следует определять в соответствии с требованиями ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.3 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава.

4.6. (Исключен, Изм. № 1).

4.7. Влажность керамзитобетона следует определять по ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.2 испытанием проб, отобранных из готовых блоков.

От каждого блока следует отобрать не менее двух проб.

Допускается определять влажность бетона блоков диэлькометрическим методом по ГОСТ 21718.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

4.8. Размеры и отклонение от прямолинейности блоков, положение монтажных петель, а также качество поверхностей и внешний вид блоков проверяют по ГОСТ 13015.

5.1. Маркировка блоков — по ГОСТ 13015.

Маркировочные надписи и знаки следует наносить на боковой поверхности блока.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

5.2. Блоки должны храниться в штабелях рассортированными по маркам и партиям и уложенными вплотную друг к другу.

Высота штабеля из блоков не должна быть более 2,5 м.

5.3. При хранении и транспортировании каждый блок должен укладываться на деревянные прокладки, расположенные по вертикали одна над другой между рядами блоков.

Подкладки под нижний ряд блоков должны укладываться по плотному, тщательно выровненному основанию.

5.4. Толщина прокладок должна быть не менее 30 мм.

5.5. Транспортирование блоков должно производиться с надежным закреплением, предохраняющим их от смещения.

Высота штабеля при транспортировании устанавливается в зависимости от грузоподъемности транспортных средств и допускаемого габарита погрузки.

5.6. Погрузка, транспортирование, разгрузка и хранение блоков должны производиться с соблюдением мер, исключающих возможность их повреждения.

5.7. Требования к документу о качестве блоков, поставляемых потребителю, — по ГОСТ 13015.

Дополнительно в документе о качестве блоков должны быть приведены марки бетона по морозостойкости и водонепроницаемости, а также водопоглощение бетона (если эти показатели оговорены в заказе на изготовление блоков).

(Измененная редакция, Изм. № 1).

6.1. Изготовитель должен гарантировать соответствие поставляемых блоков требованиям настоящего стандарта при соблюдении потребителем правил транспортирования, условий применения и хранения блоков, установленных настоящим стандартом.

МОНТАЖНЫЕ ПЕТЛИ

Спецификация и выборка стали на одну монтажную петлю

Марка монтажной петли	Поз.	Диаметр, мм	Длина, мм	Кол.	Масса, кг
П1	1	8AI	970	1	0,38
П2, П2а	2	10AI	1180		0,73
П3	3	12AI	1330		1,18
П4	4	8AI	940		0,37

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. РАЗРАБОТАН

Центральным научно-исследовательским и проектным институтом типового и экспериментального проектирования жилища (ЦНИИЭП жилища) Госгражданстроя

Всесоюзным научно-исследовательским институтом заводской технологии сборных железобетонных конструкций и изделий (ВНИИжелезобетон) Министерства промышленности строительных материалов СССР

ВНЕСЕН Государственным комитетом по гражданскому строительству и архитектуре при Госстрое СССР

2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета Совета Министров СССР по делам строительства от 30.12.77 № 234

3. ВЗАМЕН ГОСТ 13579-68

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД, на который дана ссылка	Номер пункта	Обозначение НТД, на который дана ссылка	Номер пункта
ГОСТ 5781-82	2.9	ГОСТ 12730.5-84	4.4
ГОСТ 10060.0-95	4.3	ГОСТ 13015-2003	2.7, 2.12, 3.1, 4.8, 5.1, 5.7
ГОСТ 10060.1-95	4.3	ГОСТ 17624-87	4.1
ГОСТ 10060.2-95	4.3	ГОСТ 18105-86	2.2, 2.7, 4.1
ГОСТ 10060.3-95	4.3	ГОСТ 21718-84	4.7
ГОСТ 10060.4-95	4.3	ГОСТ 22690-88	4.1
ГОСТ 10180-90	4.1	СНиП 2.03.01-84	2.3
ГОСТ 12730.0-78	4.4, 4.5, 4.7	СНиП 2.03.11-85	2.4
ГОСТ 12730.2-78	4.7	СН 165-76	2.3, 2.4
ГОСТ 12730.3-78	4.5

5. ИЗДАНИЕ (октябрь 2005 г.) с Изменением № 1, утвержденным в ноябре 1985 г. (ИУС 3-86)

ГОСТ 13579-2018 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия

Текст ГОСТ 13579-2018 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ (МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION (ISC,

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

БЛОКИ БЕТОННЫЕ ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ Технические условия

Издание официальное

*ж_.—- ..

ммжжя

СтМ1ЛфТМ1фП[М

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2—2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Акционерным обществом «ЦНИИЭП жилища — Институт комплексного проектирования жилых и общественных зданий» (АО «ЦНИИЭП жилища»)

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 465 «Строительство»

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 мая 2018 г. № 109-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Коя страны по МК(ИСО 3166) 004—97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения	AM	Минэкономики Республики Армения
Киргизия	KG	Кыргыэстандарт
Россия	RU	Росстацдарт
Таджикистан	TJ	Таджикстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 5 октября 2018 г. N9 709-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 13579—2018 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 мая 2019 г.

5 ВЗАМЕН ГОСТ 13579-78

Информация об изменениях х настоящему стандарту публикуется е ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационномуказатбле«Национальныестандарты».Вслучаепбресмотра(замены)илиотмбны настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

ГОСТ 13579—2018

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

БЛОКИ БЕТОННЫЕ ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ

Технические условия

Concrete blocks for walls of basements. Specifications

Дата введения — 2019—05—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на блоки, изготовляемые из тяжелого бетона, а также лег* кого и плотного силикатного бетона средней плотности не менее 1800 кг/м³ и предназначенные для стен подвалов и технических подпольев зданий.

Настоящий стандарт устанавливает типы и конструкции бетонных блоков стен подвалов, технические требования к ним.

Сплошные блоки допускается применять для фундаментов.

Требования настоящего стандарта следует учитывать при разработке нормативных документов и рабочей документации на бетонные блоки стен подвалов конкретных типов.

2 Нормативные ссылки

8 настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 10060—2012 Бетоны. Методы определения морозостойкости

ГОСТ 10180—2012 Бетоны. Методы определения прочности по контрольным образцам

ГОСТ 10922—2017 Арматурные и закладные изделия, их сварные, вязаные и механические

соединения для железобетонных конструкций. Общие технические условия

ГОСТ 12730.0—78 Бетоны. Общие требования к методам определения плотности, влажности.

водопоглощения. пористости и водонепроницаемости

ГОСТ 12730.2—78 Бетоны. Метод определения влажности ГОСТ 12730.3—78 Бетоны. Метод определения водопоглощения ГОСТ 12730.5—84 Бетоны. Методы определения водонепроницаемости

ГОСТ 13015—2012 Изделия бетонные и железобетонные для строительства. Общие технические требования. Правила приемки, маркировки, транспортирования и хранения

ГОСТ 17624—2012 Бетоны. Ультразвуковой метод определения прочности ГОСТ 18105—2010 Бетоны. Правила контроля и оценки прочности

ГОСТ 21718—84 Материалы строительные. Диалькометрический метод определения влажности ГОСТ 22690—2015 Бетоны. Определение прочности механическими методами неразрушающего

контроля

ГОСТ 26433.0—85 Система обеспечения точности геометрических параметров в строительстве.

Правила выполнения измерений. Общие положения

ГОСТ 26433.1—89 Система обеспечения точности геометрических параметров в строительстве.

Правила выполнения измерений. Элементы заводского изготовления

ГОСТ 34028—2016 Прокат арматурный для железобетонных конструкций. Технические условия

Издание официальное

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет иш по ежегодному информационному указателю «Национагъные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 блок: Конструктивный сборный элемент или изделие прямоугольной формы, массой от десятка килограммов до нескольких тонн, изготовляемый обычно в заводских условиях.

3.2 бетонный блок: Блок, прочность которого в стадии эксплуатации обеспечивается одним бетоном. Блок считается бетонным, если е нем имеется конструктивное армирование или рабочая арматура на ограниченных участках — зонах концентрации усилий.

3.3 бетонный блок для стен подвала: Бетонный блок, применяемый для устройства стен подвала или технического подполья здания.

4 Типы и конструкция блоков

4.1 Блоки подразделяют на три типа:

ФБС — сплошные;

ФБВ — с вырезом для укладки перемычек и пропуска коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев:

ФБП — пустотные (с открытыми вниз пустотами).

4.2 Форма и размеры блоков должны соответствовать указанным на рисунках 1.2.3 и в таблице 1.

А — блоки шириной 300 мм

Б — блоки шириной 400, 500,600 мм

1-1 А

Рисунок 2 — Блоки типа ФБВ

2-2

R45 при Ь = 400

Рисунок 3 — Блоки типа ФБП

П2 — монтажные петли

Таблица 1

Тип блока	Основные размеры блоха, мм
Длина 1	Ширина b	высота b
ФБС	2380	300 400 500 600	580
1180	400 500 600
400 500 600	280
880	300 400 500 600	580
ФБВ	400 500 600
ФБП	2380	400 500 600	580
Примечание —Допускается изготовлять блоки размерами, отличными от указанных в настоящей табгм-це. на действующем оборудовании по согласованию между заказчиком и предприятием-изготовителем.

4.3 Структура условного обозначения (марок) блоков следующая:

Рииври блока в дмтютрос Длина (округленно)

Шфнна

высота (округленно)

Вир батоне:

тажягый-Т

летний-Л

ПШЛМв (МЛИЖТНЫН-С Обозначение натвищжо стандарта

Пример условного обозначени я (марки) блока типа ФБС длиной 2380 мм, шириной 400 мм и высотой 580 мм из тяжелого бетона:

ФБС 24.4.6-Т ГОСТ 13579—2018

То же. типа ФБВ длиной 880 мм. шириной 400 мм и высотой 580 мм из легкого бетона:

ФБВ 9.4.6-Л ГОСТ 13579—2018

То же. типа ФБП длиной 2380 мм. шириной 500 мм и высотой 580 мм из плотного силикатного бетона:

ФБП 24.S.6-C ГОСТ 13579—2018

Примечание — Допускается принимать обозначения марок блоков в соответствии с рабочими чертежами типовых конструкций.

4.4 Марки и характеристики блоков из тяжелого бетона приведены в таблице 2. из легкого бетона — в таблице 3. из плотного силикатного бетона — в таблице 4.

При соответствующем обосновании допускается применение блоков из бетонов классов по прочности на сжатие, отличающихся от указанных в таблицах 2—4. При этом во всех случаях класс бетона по прочности на сжатие следует принимать не более В15 и не менее:

В3.5 — для блоков из тяжелого и легкого бетонов;

В12.5 — для блоков из плотного силикатного бетона.

Примечание — В условное обозначение блоков из бетонов классов по прочности на сжатие, отличающихся от указанных в таблицах 2—4, следует вводить соответствующий цифровой индекс перед буквой В. обозначающей вид бетона.

4.5 Расположение монтажных петель в блоках должно соответствовать указанному на рисунках 1—3. Конструкции монтажных петель приведены на рисунке А.1 приложения А.

Таблица 2

Марка блока	Класс бетона по прочности ия сжатие	Монтажная петля	Расход материалов (справочный)	Масса бетона (справочная), т
Марка	Количество. шт.	Бетон. „3	Стал*. «г
ФБС 24.3.6-Т ФБС 24.4.6-Т		П2а		0.406 0.543	1.46	0.97 1,30
ФБС 24.5.6-Т ФБС 24.6.6-Т		ПЗ		0,679 0.815	2.36	1.63 1.96
ФБС 12.4.6-Т ФБС 12.5.6-Т ФБС 12.6.6-Т		П2		0.26S 0.331 0.398	1.46	0.64 0.79 0.96
ФБС 12.4.3-Т ФБС 12.5.3-Т ФБС 12.6.3-Т	В7.5	П4	2	0,127 0.159 0.191	0,74	0.31 0.38 0.46
ФБС 9.3.6-Т ФБС 9.4.6-Т ФБС 9.5.6-Т		П1	0.146 0.195 0.244	0.76	0.35 0.47 0.59
ФБС 9.6.6-Т		П2		0.293	1,46	0.70
ФБВ 9.4.6-Т ФБВ 9.5.6-Т ФБВ 9.6.6-Т		П1		0.161 0.202 0.243	0.76	0.39 0.49 0.58
ФБП 24.4.6-Т ФБП 24.5.6-Т ФБП 24.6.6-Т	В 12.5	П2		0.439 0.526 0.583	1.46	1.05 1.26 1.40
Примечание — Значения массы приведены с учетом изготовления блоков из тяжелого бетона средней плотности 2400 кг/м³.

Таблица 3

Мари блока	Класс бетона по прочности ио сжатие	Монтажная петля	Расход материалов (справочный)	Масса бетона {справочная). I
Марка	Количество. шт.	Бетой, м3	Сталь. кг
ФБС 24.3.6-Л ФБС 24.4.6-Л ФБС 24.5.6-Л		П2а		0.406 0.543 0,679	1.46	0.73 0.98 1.22
ФБС 24.6.6-Л		ПЗ		0.815	2.36	1.47
ФБС 12.4.6-Л		П1		0.265	0.76	0.48
ФБС 12.5.6-Л		П2		0.331	1.46	0.60
ФБС 12.6.6-Л		П2		0.398		0.72
ФБС 12.4.3-Л ФБС 12.5.3-Л ФБС 12.6.3-Л	В7.5	П4	2	0.127 0.159 0,191	0,74	0.23 0.29 0.35
ФБС 9.3.6-Л ФБС 9.4.6-Л ФБС 9.5.6-Л ФБС 9.6.6-Л ФБВ 9.4.6-Л ФБВ 9.5.6-Л ФБВ 9.6.6-Л		П1		0.146 0.195 0.244 0.293 0.161 0,202 0.243	0.76	0.26 0.35 0.44 0.53 0.29 0.37 0.44
ФБП 24.4.6-Л ФБП 24.5.6-Л ФБП 24.6.6-Л	В12.5	П2		0.439 0.526 0.583	1.46	0.79 0.95 1.05

Примечание — Значения массы, а также марка монтажных петель приведены с учетом изготовления блоков из легкого бетона средней плотности 1800 кг/м³.

Таблица 4

Мари блока	Класс бетона по прочности не сжатие	Монтажная петля	Расход материалов (справочный)	Масса бетона (справочная), т
Марка	Количество. шт.	Бетон. м3	Стань. кт
ФБС 24.3.6-С ФБС 24.4.6-С ФБС 24.5.6-С		П2а		0.406 0.543 0.679	1.46	0.81 1.09 1.36
ФБС 24.6.6-С		ПЗ		0.815	2.36	1.63
ФБС 12.4.6-С		П1		0.265	0.76	0.53
ФБС 12.5.6-С ФБС 12.6.6-С		П2		0.331 0,398	1.46	0.66 0.80
ФБС 12.4.3-С ФБС 12.5.3-С ФБС 12.6.3-С	В15	П2а	2	0.127 0.159 0.191	0,74	0.25 0.32 0.38
ФБС 9.3.6-С ФБС 9.4.6-С ФБС 9.5.6-С ФБС 9.6.6-С ФБВ 9.4.6-С ФБВ 9.5.6-С ФБВ 9.6.6-С		П1		0.146 0.195 0.244 0.293 0.161 0,202 0.243	0.76	0.29 0.39 0.49 0.59 0.32 0.40 0.49

Окончание таблицы 4

Мерка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Монтажная петля	Расход материалов (справочный)	Массе бетона
Марка	Количество. шт	Бетон. м^э	Стала. кг	(сл рааочная)« т
ФБП 24.4.6-С ФБП 24.5.6-С	В15	П2	2	0.439 0.526	1.46	0.88 1.05
ФБП 24.6.6-С	0.583	1.17
Примечание — Значения массы, а также марка монтажных петель приведены с учетом изготовления блоков из силикатного бетона средней плотности 2000 кг/м³.

Примечание к таблицам 2—4 — Справочные значения показателей расхода стали приведены для определения сметной стоимости изделия.

4.6 При применении для подъема и монтажа блоков специальных захватных устройств допускается, по согласованию изготовителя с потребителем и проектной организацией, изготовление блоков без монтажных петель.

5 Технические требования

5.1 Материалы, применяемые для приготовления бетона, должны обеспечивать выполнение технических требований, установленных настоящим стандартом, и соответствовать действующим стандартам или техническим условиям на эти материалы.

5.2 Бетон

5.2.1 Фактическая прочность бетонных блоков (в проектном возрасте и отпускная) должна соответствовать требуемой, назначаемой по ГОСТ 18105 в зависимости от нормируемой прочности бетона, указанной в проектной документации на здание или сооружение, и от показателя фактической однородности прочности бетона.

5.2.2 Морозостойкость и водонепроницаемость бетона следует обозначить в проекте в зависимости от режима эксплуатации конструкций и климатических условий района строительства согласно нормативным документам на тяжелый и легкий бетоны¹ и плотный силикатный бетон², действующим на территории государства — участника Соглашения, принявшего настоящий стандарт.

5.2.3 Бетон, а также материалы для приготовления бетонных блоков, предназначенных для применения в условиях воздействия агрессивной среды, должны удовлетворять требованиям действующих нормативных документов³, действующих на территории государства — участника Соглашения, принявшего настоящий стандарт, а также дополнительным требованиям для блоков из плотного силикатного бетона нормативных документов², действующих на территории государства — участника Соглашения. принявшего настоящий стандарт.

5.2.4 Классы бетона по прочности на сжатие, марки бетона по морозостойкости и водонепроницаемости. а при необходимости и требования к бетону и материалам для его приготовления (см. 5.4) должны соответствовать проектным, указываемым в заказах на изготовление блоков.

5.2.5 Поставку блоков потребителю следует производить после достижения бетоном требуемой отпускной прочности (см. 5.1).

5.2.6 Значение нормируемой отпускной прочности бетонных блоков (в процентах от класса по прочности на сжатие) следует принимать не менее:

50 — для бетона класса В15 и выше:

70 — для бетона класса В12.5 и ниже:

100 — для бетона автоклавного твердения.

Знамение нормируемой отпускной прочности бетона следует принимать по проектной документа* ции на конкретное здание или сооружение в соответствии с требованиями ГОСТ 13015.

Поставку блоков с отпускной прочностью бетона ниже прочности, соответствующей его классу по прочности на сжатие, проводят при условии, если изготовитель гарантирует достижение бетоном требуемой прочности в проектном возрасте, определяемой по результатам испытания контрольных образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава и хранившихся в условиях согласно ГОСТ 18105.

5.2.7 При отпуске блоков потребителю влажность легкого бетона не должна быть более 12 %.

5.3 Арматурные изделия

5.3.1 Монтажные петли блоков следует изготовлять из стержневой горячекатаной гладкой арматуры класса А240 марок ВСтЗпс2 и ВСтЗсп2 или периодического профиля класса АсЗОО марки 10ГТ по ГОСТ 34028.

Арматуру из стали марки ВСтЗпс2 не допускается применять для монтажных петель, предназначенных для подъема и монтажа блоков при температуре ниже минус 40 *С.

5.3.2 Требования к маркам сталей для арматурных изделий (в том числе монтажных петель), а также к защите от коррозии открытых поверхностей арматурных изделий — по ГОСТ 13015.

5.3.3 Форма и размеры арматурных изделий и их положение в блоках должны соответствовать указанным в рабочих чертежах.

5.3.4 Сварные арматурные и стальные закладные изделия должны соответствовать требованиям ГОСТ 10922.

5.4 Точность геометрических параметров блоков

5.4.1 Отклонения проектных размеров блоков не должны превышать, мм:

по длине………………………………..±13:

по ширине и высоте………………………..±8;

по размерам вырезов……………………….±5.

5.4.2 Отклонение от прямолинейности профиля поверхностей блока не должно превышать 3 мм на всей длине и ширине блока.

5.5 Качество поверхностей блоков

5.5.1 Требования к качеству поверхностей блоков — по ГОСТ 13015.

Устанавливаются следующие категории бетонной поверхности блоков:

АЗ — лицевой, предназначенной под окраску:

А5 — лицевой, предназначенной под отделку керамическими плитками, укладываемыми по слою раствора:

А6 — лицевой, неотделываемой;

А7 — нелицевой, не видимой в условиях эксплуатации.

5.5.2 В бетоне блоков, принимаемых согласно разделу 6. не допускаются трещины, за исключением местных поверхностных усадочных, ширина которых не должна превышать 0.1 мм в блоках из тяжелого и плотного силикатного бетонов и 0.2 мм — в блоках из легкого бетона.

5.5.3 Монтажные петли должны быть очищены от наплывов бетона.

6 Правила приемки

6.1 Приемку блоков следует проводить партиями в соответствии с требованиями ГОСТ 13015 и настоящего стандарта.

6.2 Приемку блоков по морозостойкости и водонепроницаемости бетона, отпускной влажности легкого бетона, а также по водопоглощению бетонных блоков, предназначенных для эксплуатации в среде с агрессивной степенью воздействия, следует проводить по результатам периодических испытаний.

6.3 Испытания бетона на водонепроницаемость и водопоглощение блоков, к которым предъявляют эти требования, следует проводить не реже одного раза в 3 мес.

6.4 Отпускную влажность легкого бетона следует контролировать не реже одного раза в месяц по результатам испытания проб, отобранных из трех готовых блоков.

6.5 Приемку блоков по показателям прочности бетона (классу бетона по прочности на сжатие и отпускной прочности), соответствия монтажных петель требованиям настоящего стандарта, точности геометрических параметров, ширины раскрытия технологических трещин и категории бетонной поверх* ности блоков следует проводить по результатам приемо-сдаточных испытаний и контроля.

6.6 Приемку блоков по показателям точности геометрических параметров, категории бетонной поверхности и ширины раскрытия технологических трещин следует осуществлять по результатам выборочного контроля.

6.7 Приемку блоков по наличию монтажных петель, правильности нанесения маркировочных надписей и знаков следует проводить путем сплошного контроля с отбраковкой блоков, имеющих дефекты по указанным показателям.

7 Методы контроля и испытаний

7.1 Прочность бетона на сжатие следует определять по ГОСТ 10180 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава и хранившихся в условиях, установленных ГОСТ 18105.

При испытании блоков методами неразрушающего контроля фактическую отпускную прочность бетона на сжатие следует определять ультразвуковым методом по ГОСТ 17624 или приборами механического действия по ГОСТ 22690. а также другими методами, предусмотренными стандартами на методы испытания бетона.

7.2 Марку бетона по морозостойкости следует определять по ГОСТ 10060.

7.3 Водонепроницаемость бетонных блоков следует определять по ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.5 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава.

7.4 Водопоглощение бетонных блоков, предназначенных для применения в условиях воздействия агрессивной среды, следует определять е соответствии с требованиями ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.3 на серии образцов, изготовленных из бетонной смеси рабочего состава.

7.5 Влажность легкого бетона следует определять по ГОСТ 12730.0 и ГОСТ 12730.2 испытанием проб, отобранных из готовых блоков.

От каждого блока следует отобрать не менее двух проб.

Допускается определять влажность бетона блоков дизлькометрическим методом по ГОСТ 21718.

7.6 Размеры и отклонения от прямолинейности блоков, положение монтажных петель, ширину раскрытия технологических трещин, размеры раковин, наплывов и околов бетонных блоков следует определять методами, установленными ГОСТ 26433.0 и ГОСТ 26433.1.

8 Маркировка, хранение и транспортирование

8.1 Маркировка

8.1.1 Маркировку блоков следует проводить по требованиям ГОСТ 13015.

8.1.2 Маркировочные надписи и знаки следует наносить на боковую поверхность блока.

Допускается по согласованию изготовителя с потребителем и проектной организацией — автором

проекта конкретного здания вместо марок наносить на блоки их сокращенные условные обозначения, принятые е проектной документации конкретного здания.

8.2 Хранение и транспортирование

8.2.1 Хранить и транспортировать плиты следует в соответствии с требованиями ГОСТ 13015 и настоящего стандарта.

8.2.2 Блоки следует хранить в штабелях рассортированными по маркам и партиям и уложенными вплотную друг к другу.

Высота штабеля из блоков должна быть не более 2.5 м.

8.2.3 При хранении и транспортировании каждый блок следует укладывать на прокладки.

Прокладки должны быть расположены по вертикали одна над другой в местах, указанных в рабочих чертежах, а при отсутствии таких указаний — между рядами блоков.

Подкладки под нижний ряд блоков следует укладывать ло плотному, тщательно выровненному основанию.

8.2.4 Толщина прокладок должна быть не менее 30 мм.

8.2.5 При транспортировании блоки должны быть надежно закреплены от смещения.

высоту штабеля при транспортировании устанавливают в зависимости от грузоподъемности транспортных средств и допускаемых габаритов погрузки.

8.2.6 Погрузку, транспортирование, разгрузку и хранение блоков следует проводить с соблюдением мер. исключающих возможность их повреждения.

8.2.7 Требования к документу о качестве блоков, поставляемых потребителю. — по ГОСТ 13015.

Дополнительно в документе о качестве блоков должны быть приведены марки бетона по морозостойкости и водонепроницаемости, а также по водопоглощению (если эти показатели оговорены в заказе на изготовление блоков).

9 Гарантии изготовителя

Изготовитель должен гарантировать соответствие поставляемых блоков требованиям настоящего стандарта и технических условий при соблюдении транспортными организациями правил транспортирования. а потребителем — условий применения и хранения блоков, установленных настоящим стандартом.

Приложение А (обязательное)

Монтажные петли

На рисунке А.1 и в таблице А.1 приведены монтажные петли П1. П2. П2а. ПЗ. П4.

Рисунок А.1 —Монтажные петли П1. П2. П2а. ПЗ. П4

Таблица А.1 — Спецификация и выборка стали на одну монтажную петпо

МОРЮ) монтажной петли	Позиция	Класс арматуры	Диаметр. мм	Длина. нм	Количество. шт	Масса. кт
П1	1	А240	в	970		0.38
П2. П2а	2	А240	10	1180	4	0,73
ПЗ	3	А240	12	1330	1	1.18
ГМ	4	А240	8	940		0,37

УДК 691.328.1.022*413:006.354 МКС 91.080.40

Ключевые слова: блок бетонный, блок подвала, длина и ширина, марка, бетон, класс, технические требования, монтажная петля

БЗ 6—2018/57

Редактор Л.С. Зимипова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор Л.С. Лысенко Компьютерная верстка И.А. Напейкиной

Сдано в набор 08.. Гарнитура Ариал. Усл. печ. л. 1.86. Уч.-иад. л. 1.68.

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

Создано в единичном исполнении . 117418 Москва, Нахимовский пр-т, д. 31. к. 2. wwbv.gostinfo.ru

В Российской Федерации действует СП 63.13330.2012 «СНиП 52-01—2003 Бетонные и железобетонные конструкции. Основные положения».

В Российской Федерации действует СП 95.13330.2016 «СНиП 2.03.02—86 Бетонные и железобетонные конструкции из плотного силикатного бетона».

В Российской Федерации действует СП 28.13330.2012 «СНиП 2.03.11—85 Защита строительных конструкций от коррозии».

Блоки ФБС ГОСТ: фундаментные блоки 13579 78

Фундаментальные блоки – это один из самых популярных видов изделий из бетона, которые изготовляются заводским путем. На практике ФБС можно встретить в строительных проектах фундаментов, цокольных и подвальных помещений здания. Стоит учесть, что при выполнении установки обязательно нужно предусматривать заглубления, которые влияют на прочность основания. Фундаментальные блочные устройства вне зависимости от количества этажей помещения могут монтироваться как для основания, так и для второстепенных составляющих здания. Производительность и качество материала регламентируется Гост 13579 – 85 и Гост 13579 – 78. Обо всех особенностях ФБС мы и поговорим в нашей статье.

Понятие ФБС

ФБС – это прочный и надежный материал, который применяется как в частном, так и коммерческом строительстве

ФБС – это прочный и надежный материал, который применяется как в частном, так и коммерческом строительстве. Среднестатистического потребителя такие блоки привлекают в качестве материала для монтажных работ по созданию жилых домов. Данная аббревиатура имеет такую расшифровку: фундаментные блоки стеновые. Более экономичного и практичного материала на сегодняшний день не существует.

Данные изделия, создаются из цемента выше М 50, который имеет высокую прочность и стойкость к морозу. Производство происходит выливанием их в формах, от которых и отталкиваются размеры ФБС. Стоит отметить, что данные требования прописаны в 78 и 85 статье Гост 13579.

Свойства блоков

Для того, чтоб сделать правильный выбор, нужно знать все достоинства и недостатки деталей

Для того, чтоб сделать правильный выбор, нужно знать все достоинства и недостатки деталей. Среди плюсов функционирования следует выделить такие характеристики:

Рекомендуем к прочтению:

Высокий уровень прочности, долговечности и устойчивости к деформации;
Фундаментные блоки не поддаются воздействию биологической среды, а именно таких процессов как плесень, грибки и другие типы бактерий;
Обладают устойчивостью к морозу;
Имеет высокие показатели по экологическим нормам;
Огромный ассортимент, который различают размеры и формы ФБС.

Технология изготовления

Если рассматривать технологию создания ФБС, то на сегодняшний день существует несколько вариантов их изготовления

Если рассматривать технологию создания ФБС, то на сегодняшний день существует несколько вариантов их изготовления. Выбор подхода зависит от наполнителя бетона. Так, на рынке можно встретить такие способы:

Керамзитобетонные или силикатные модели. Плотность составляет 1800 кг на куб. м, и определяет размеры веса блоков.
Фундаментные блоки, сделанные из высококачественного бетона;
Блок из цемента М 100 – это одна из самых дешевых категорий.

Согласно Гост, 78 отлив ФБС должен происходить в специальных формах или методом сиюминутной распалубки. Для второго способа характерно сечение, трапециевидной формы. Стоит учесть, что помимо цемента, в состав блоков входят пластификаторы и присадки.

Внимание! Все делали и составляющие конструкции, а также их размеры регулируются стандартами.

Размеры и маркировка

Если принято решение покупать фундаментные составляющие, то необходимо смотреть на маркировку, где каждая цифра имеет свое значение

Помимо плотности, стойкости к морозу, весу конструкции очень важную роль играют размеры блоков. Для определения величины нужно рассчитать площадь основания дома, толщину стен и перекрытий.

Внимание! Стандартными и самыми популярными являются прямоугольные и кубические модели блоков (6).

Если принято решение покупать фундаментные составляющие, то необходимо смотреть на маркировку, где каждая цифра имеет свое значение. Например, блоки 6-4-6 означают показатели высоты, длины и ширины. Стоит отметить, что 6 означает 60 см или 0,6 метра.

Рекомендуем к прочтению:

Общие черты применения блоков

Прежде, чем начать закладку фундамента нужно провести геодезический анализ почвы, который проверяют сочетаемость ее с планом проекта

Прежде, чем начать закладку фундамента нужно провести геодезический анализ почвы, который проверяют сочетаемость ее с планом проекта. Затем этой организацией выдается разрешение на покупку и дальнейшую установку блоков. Ведь для каждого типа грунта существуют определенные виды ФБС. Гост. 78 выдвигает список требований и рекомендаций относительно различных земельных типов:

Если на территории песчаные грунты, то блоки нужно устанавливать неглубоко, до 0,7 метров;
Для щебневой почвы наоборот, нужно помещать ФБС глубоко;
Для почвы с примесями глины нужно выбирать самые прочные модели, например, ФБС 24.

Внимание! При таких устройствах реально возведение подвального пространства, которое можно еще и обогревать.

В данной статье описана блочная конструкция для фундамента, которая на сегодняшний день считается одной из самых востребованных технологий возведения основания. Также мы изучили типы сборных элементов, размеров, особенности регулирования производства и маркировки. Надеюсь, представленная информация пригодится вам в практической деятельности.

Блоки стен подвалов (ФБС) Блоки ленточных фундаментов (ФЛ)

ФЛ — железобетонные изделия из тяжелого бетона для устройства ленточных фундаментов;
ФБС — бетонные сплошные неармированные изделия для устройства стен подвалов, технических подполий и фундаментов;

Последующие цифры после буквенной маркировки означают размеры в дециметрах, округленные до целого числа: длина, ширина и высота в дециметрах или ширина и длина (для ФЛ). Первое число обозначает длину, второе число – ширину, а третье – высоту.

Блоки ленточных фундаментов ФЛ

Данные блоки еще называют фундаментными подушками, а все основные конструктивные требования (в части габаритов, устойчивости к нагрузке) определяет ГОСТ 13580-85 на размеры на ленточный фундамент, ведь во многом от габаритов и зависит работоспособность всей конструкции.

Блок имеет расширенное основание, существующий ГОСТ предполагает выпуск элементов со следующими типовыми размерами: Длина — 780; 1180 и 2380 мм, благодаря этому существует возможность монтажа, не прибегая к подгонке по этому размеру.
Ширина — данный ряд более обширен, в него входит 10 значений от 600 до 3200 мм. На выбор плиты по данному параметру оказывают влияние конструктивные особенности фундамента и предполагаемая нагрузка. Высота — 300 и 500 мм, эти размеры считаются основными типовыми.

Фундаментные подушки используются при строительстве загородных домов, коттеджей, других типов помещений. Они незаменимы при устройстве цокольных помещений и подвалов. Все блоки данного класса изготовлены из тяжелых марок бетона, они должны отвечать требованиям ГОСТ на основания и фундаменты.

Блоки стен подвалов ФБС.

Блоки ФБС используются для монтажа основной конструкции фундамента. Они позволяют ускорить строительство, но для монтажа потребуется применение подъемной техники. ГОСТ ФБС – 13579-78.
Существует целый ряд типоразмеров, позволяющих возвести конструкцию с различной несущей способностью:
По высоте отличают два основных стандарта — 280 и 580 мм.
По ширине блоки делят на следующие виды — от 300 до 600 мм (с шагом 100 мм).
По длине так же разделяются на целые и доборные элементы (880; 1180 и 2380 мм).
Несмотря на это при монтаже достаточно часто приходится ломать блоки на более мелкие элементы (по длине), для этого применяют различные способы и технологии.

Фундаменты из железобетонных блоков применяются для монтажа различных типов оснований, практически единственным исключением являются свайные конструкции. Дело в том, что ГОСТ на свайные фундаменты был рассчитан исходя из несколько другого принципа работы, немалую роль в которой играют силы трения опорного элемента и грунта. А фундаментные блоки в основном передают нагрузку на устойчивые слои почвы или на подготовленную подушку.

Более подробно о монтаже и основных достоинствах фундаментов из ФБС читайте на нашем сайте ТУТ.

ГОСТ на блоки ФБС

Производственный комбинат «ЖБИ 24/7» предлагает предприятиям строительной отрасли недорогие и качественные железобетонные изделия.

Блоки бетонные фундаментные ФБС производятся по стандарту ГОСТ 13579-2018, введённому в действие взамен ГОСТ 13579 78. Документ содержит информацию о типах и конструкции блоков, области их применения, условных обозначениях. Приведены данные о расположении, марках и конструкции монтажных петель, о справочном расходе стали и допусках при монтаже.

Документ содержит допуски и предельные отклонения геометрических параметров, технические требования к бетону и армирующим изделиям, качеству поверхности.

Конструкция и применение

Бетонные блоки ФБС (фундаментные стеновые) — это изделия прямоугольной формы, весом от нескольких килограммов до нескольких тонн. Применяются в частном и коммерческом строительстве для устройства фундаментов, стен подвальных и технических подпольных помещений. ГОСТ 13579 78 и 13579-2018 разделяют изделия на 3 типа: ФБС — сплошные, ФБП — пустотные, ФБВ — с вырезом для пропуска коммуникаций и укладки перемычек.

Достоинства сплошных блоков:

простота укладки и большой выбор по длине, ширине и высоте;
стойкость к деформации, способность воспринимать высокие нагрузки, долговечность, морозоустойчивость;
возможность эксплуатации в умеренно-агрессивной среде, невосприимчивость к влаге, грибкам, бактериям и другим микроорганизмам.

Рис. 1. Блок ФБС шириной 300 мм

Рис. 2. Блок ФБС шириной 400, 500 и 600 мм.

Выбор блоков для закладки фундамента определяется типом грунта. Предварительно проводят геологические изыскания, после чего организация делает заключение о возможности использования ФБС. Глубина установки зависит от типа почвы: на щебневой изделия заглубляют, на песчаной устанавливают неглубоко.

Размеры изделий

Основные размеры фундаментных блоков ФБС по ГОСТ указаны в таблице. Кроме плотности, морозостойкости, марки бетона и веса изделий, следует учитывать габариты. Чтобы подобрать изделия с нужными параметрами, нужно знать толщину перекрытий и стен, площадь основания дома, расчётную нагрузку на фундамент. Блоки ФБС, изготовленные по стандарту ГОСТ 13579 78, могут иметь незначительные отличия от изделий, выпущенных по ГОСТ 13579-2018

Тип блока	Основные размеры блока, мм
	Длина	Ширина	Высота
ФБС	2380	300; 400; 500; 600	580
	1180	400; 500; 600	280; 580
	880	300; 400; 500; 600	580

Габариты изделия определяют по условному обозначению, которое выглядит как буквенно-цифровые индексы. Пример расшифровки наименования ФБС24.4.6-Т ГОСТ 13579-78:

ФБС — фундаментный блок сплошной, 24 — длина в дециметрах, округленная до целого числа;
4 — высота в дециметрах, 6 — ширина (в них же), Т — тип бетона (тяжёлый), из которого изготовлена продукция;
ГОСТ 13579-78 — стандарт, требованиям которого соответствуют выпущенные изделия.

Кроме тяжёлого бетона, фундаментные элементы изготавливаются из плотного силикатного и на пористых заполнителях (керамзитобетона). Предприятие может применять другие обозначения марок, в соответствии с рабочими чертежами.

Технические характеристики

Класс бетона по прочности на сжатие для сплошных блоков из тяжёлого и лёгкого бетона — В7,5 (М100), из плотного силикатного — В15 (М200). При соответствующем обосновании допускается применять бетон других марок, при этом класс по прочности на сжатие должен быть не выше В15 и не ниже В12,5 для ФБС из силикатного бетона и В3,5 — из лёгкого и тяжёлого.

Таблица 1. Характеристики ФБС из тяжёлого бетона

Марка блока	Класс бетона по прочности на сжатие	Монтажная петля		Расход материалов		Масса блока (справочная), т
		Марка	Кол.	Бетон, м	Сталь, кг
ФБС24.3.6-Т	В7,5	П2а	2	0,406	1,46	0,97
ФБС24.4.6-Т				0,543		1,30
ФБС24.5.6-Т		П3		0,679	2,36	1,63
ФБС24.6.6-Т				0,815		1,96
ФБС12.4.6-Т		П2		0,265	1,46	0,64
ФБС12.5.6-Т				0,331		0,79
ФБС12.6.6-Т				0,398		0,96
ФБС12.4.3-Т		П4		0,127	0,74	0,31
ФБС12.5.3-Т				0,159		0,38
ФБС12.6.3-Т				0,191		0,46
ФБС9.3.6-Т		П1		0,146	0,76	0,35
ФБС9.4.6-Т				0,195		0,47
ФБС9.5.6-Т				0,244		0,59
ФБС9.6.6-Т		П2		0,293	1,46	0,70

Таблица 2. Характеристики ФБС из лёгкого бетона


Марка блока	Класс бетона по прочности	Монтажная петля		Расход материалов (справочный)		Масса бетона (справочная), т
	на сжатие	Марка	Количество, шт.	Бетон, м	Сталь, кг
ФБС 24.3.6-Л	В7,5	П2а	2	0,406	1,46	0,73
ФБС 24.4.6-Л				0,543		0,98
ФБС 24.5.6-Л				0,679		1,22
ФБС 24.6.6-Л		П3		0,815	2,36	1,47
ФБС 12.4.6-Л		П1		0,265	0,76	0,48
ФБС 12.5.6-Л		П2		0,331	1,46	0,60
ФБС 12.6.6-Л		П2		0,398	0,74	0,72
ФБС 12.4.3-Л		П4		0,127		0,23
ФБС 12.5.3-Л				0,159		0,29
ФБС 12.6.3-Л				0,191		0,35
ФБС 9.3.6-Л		П1		0,146	0,76	0,26
ФБС 9.4.6-Л				0,195		0,35
ФБС 9.5.6-Л				0,244		0,44
ФБС 9.6.6-Л				0,293		0,53

Таблица 3. Характеристики ФБС из силикатного бетона средней плотности (2000 кг/куб. м)


Марка блока	Класс бетона по прочности	Монтажная петля		Расход материалов (справочный)		Масса бетона (справочная), т
	на сжатие	Марка	Количество, шт.	Бетон, м	Сталь, кг
ФБС 24.3.6-С	В15	П2а	2	0,406	1,46	0,81
ФБС 24.4.6-С				0,543		1,09
ФБС 24.5.6-С				0,679		1,36
ФБС 24.6.6-С		П3		0,815	2,36	1,63
ФБС 12.4.6-С		П1		0,265	0,76	0,53
ФБС 12.5.6-С		П2		0,331	1,46	0,66
ФБС 12.6.6-С				0,398		0,80
ФБС 12.4.3-С		П2а		0,127	0,74	0,25
ФБС 12.5.3-С				0,159		0,32
ФБС 12.6.3-С				0,191		0,38
ФБС 9.3.6-С		П1		0,146	0,76	0,29
ФБС 9.4.6-С				0,195		0,39
ФБС 9.5.6-С				0,244		0,49
ФБС 9.6.6-С				0,293		0,59

В компании «ЖБИ 24/7» вы можете купить любое количество ФБС, изготовленных по ГОСТ 13579-2018 (взамен ГОСТ 13579 78) с доставкой по Москве, МО и в соседние области.

ГОСТ 13579— 2018 БЛОКИ БЕТОННЫЕ ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ

ФБС 24-4-6 с по стандарту: ГОСТ 13579-78

Фундаментные блоки стеновые ФБС 24-4-6 с — это строительные материалы, выполненные из армированного сталью бетона в полном соответствии с действующими нормативами и официальными стандартами качества. Конструкция таких изделий представляет собой параллелепипед с вертикальными сквозными отверстиями в нижней части. Отверстия имеют пирамидальные очертания и располагаются на одинаковом расстоянии друг от друга. Шаг одного зазора отвечает ширине изделия. При этом толщина стенок должна составлять не менее 100 мм. Подобное устройство позволяет в разы уменьшить расход недешевых материалов при организации сборных фундаментов для зданий различного типа. Кроме того за счет наличия множественных пустот вес блоков уменьшается настолько, что они вполне подходят даже для ручной кладки.

1. Варианты маркировки

Варианты написания маркировочных обозначений определяются действующими Регламентами Серия 1.116.1-8 и ГОСТ 13579-78, о которых чуть позже. Наиболее часто используются такие виды маркировки:

1. ФБС 24-3-6 п;

2. ФБС 24-3-6 с;

3. ФБС 24-4-6 п;

4. ФБС 24-4-6с.

2. Основная сфера применения

Стеновые блоки ФБС применяются в малоэтажном гражданском, частном и промышленном строительстве. С их помощью обустраивают сборные ленточные фундаменты, возводят стены цокольного этажа и опорные стенки, а также используют в качестве фундамента для различного оборудования. Главное условие эксплуатации – отсутствие пучинистых и особо влагонасыщенных грунтов. Перед установкой землю покрывают песчано-щебенчатой основой, на которой располагают горизонтальную гидроизоляцию. Для этого применяют битумные растворы, рулонные материалы и всевозможные гидрофобизаторы. Преимущество такой системы в простоте монтажа, ведущей к существенной экономии времени и труда.

3. Обозначение маркировка изделия

Марка железобетонного изделия, это своеобразное имя, которое присваивается ему при производстве. Оно содержит ряд буквенно-цифровых обозначений, которые указывают на ключевые особенности блока: тип, габариты и главные технические характеристики. Рассмотрим, как расшифровывается марка ЖБИ на примере марки ФБС 24-4-6 с:

1. ФБС – фундаментальный блок стеновой;

2. 24 – длина в дц.;

3. 4 – ширина в дц.;

4. 6 – высота в дц.;

5. с-силикатный бетон.

При нанесении маркировочных обозначений непосредственно на изделия часто прописывается также дата выпуска партии и название компании-производителя. С полным списком размерных показателей данных конкретных изделий можно ознакомиться ниже:

Длина = 2380;

Ширина = 400;

Высота = 580;

Вес = 1090;

Объем бетона = 0,543;

Геометрический объем = 0,5522.

4. Изготовление и основные характеристики

Блок ФБС 24-4-6 с – это типовое изделие, изготовление которого строго регламентируется официальными нормативами. Так Серия 1.116.1-8 содержит все необходимые рабочие чертежи, а ГОСТ 13579-78 – правила маркировки, приемки и самого производства. Пустотные фундаментные блоки выпускаются в трех вариантах ширины: 400, 500 и 600 мм. При этом их высота и длина остаются неизменными. Изготавливаются они из тяжелого, пористого или плотного силикатного бетона класса прочности не менее В12,5 (марка М200). При организации каркаса используется горячекатаная сталь марок А-I, A-III и Вр-I. Блоки могут снабжаться специальными монтажными петлями для подъема на высоту. Если же погрузочные работы будут осуществляться методом захвата, то без таких петель можно обойтись. Требования к уровню прочности данных изделий определяются проектом самого здания в соответствии с ГОСТ 13015.0. Обязательным этапом производства является приемка – ряд испытаний неразрушающего характера, направленных на выявления любых несоответствий готовых блоков проектным значениям и наличия дефектов на поверхности. Изделия, не прошедшие такой проверки, к эксплуатации не допускаются.

5. Транспортировка и хранение

Процесс транспортировки и складирования железобетонных изделий также регулируется техническими нормативами. Нанесенная на боковую сторону марка служит для быстрой сортировки продукции. Ее распределяют по типоразмерам и хранят в штабелях высотой до 2,5 м. На площадках, предназначенных для складирования, обустраивают ровное гладкое основание. Фундаментальные блоки ФБС 24-4-6 с послойно по строгой вертикали прокладывают деревянными досками, толщина которых составляет не менее 30 мм. Главная задача грузчиков при транспортировке таких изделий – надежно зафиксировать блоки в кузове и также отделить элементы друг от друга с помощью деревянных прокладок, обезопасив их таким образом от опрокидывания и ударов. Вместе с продукцией заказчику должны доставлять всю сопутствующую техническую документацию с результатами приемо-сдаточных испытаний и техническими характеристиками изделий.

Уважаемые покупатели! Сайт носит информационный характер. Указанные на сайте информация не являются публичной офертой (ст.435 ГК РФ). Стоимость и наличие товара просьба уточнять в офисе продаж или по телефону 8 (800) 500-22-52

ГОСТ и ТУ на ФБС блоки

Основные технические характеристики для ЖБ конструкций определяются по ТУ или ГОСТ и ФБС тоже не являются исключением из правил. Такие стандарты определяют не только типовые размеры, но и класс бетона, стали для арматуры и даже количество монтажных петель для каждого размера изделий. Все блоки ФБС ГОСТ предписывает производить только в трех вариантах исполнения:

ФБС — блоки фундаментные сплошные. Используются в сборных и монолитно-сбрных фундаментах. В сечении они похожи на двухтавровую балку с укороченными полками. По названию ГОСТ Блоки фундаментные для стен подвала понятно, что они одновременно являются и фундаментом и ограждением подвальных помещений. Но ни для каких наземных стен использоваться не могут.
ФБВ — специальные блоки сплошного сечения, но с вырезом под укладку коммуникаций, фундаментных балок. Укладываются в верхнем ряду фундамента при устройстве технического подполья или подвала.
ФБП — блоки с вертикально расположенными пустотами, которые открыты на нижней плоскости изделия.

ГОСТ на ФБС определяет также и типоразмеры доборных блоков, или иначе сказать укороченных, которые всегда нужны для соблюдения правила монтажа ФБС со сдвигом соединительных швов.

У всех типов блоков со стороны торца есть специальные выемки. При монтаже на стыках получаются полости, которые замет заполняют бетонным раствором с обязательным уплотнением. Результат — получаем фундамент по прочности на сдвиг не уступающий монолитному основанию. Нормативные документы не меняется ежегодно, так как необходимости в этом нет, технология производства не меняется, типоразмеры также. Поэтому ГОСТ 13579 78 на фундаментные блоки до сих пор остается единственным и действующим.

Стандартная заводская маркировка на блоки ФБС по ГОСТ 13579 78 предусматривает указание размеров во всех трех проекциях. Поэтому, чтобы купить блоки ФБС, соответствующие спецификации в проектной документации, достаточно правильно прочитать маркировку.

Так стандартный длинный ФБС с меткой — ФБС 24.5.6 – Т означает

Фундаментный блок сплошного сечения
длина 24 дм
ширина изделия 5 дм
высота 6
Буква Т, последняя в маркировке означает, что блок изготовлен из тяжелого бетона, вместо нее может быть П из пористого из С из силикатного.

Указанный ГОСТ на ФБС единственный нормативный документ, в соответствии с которым изготовлены блоки, продаваемые нашей компании. Никаких дополнительных ТУ на заводе-изготовителе не принималось, и технология производства соблюдается строго.

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ФОНД ИЗ ФБС

Фундамент — это основная часть здания, которая передает нагрузку на основание от вышеуказанной конструкции. Его тип определяется при проектировании здания. Он должен быть очень прочным и надежным.

Фундамент ФБС — самый популярный железобетонный продукт. Сегодня это основной строительный материал, используемый для возведения и прочного

укрепления основания конструкции, для создания цоколя и стен в подвале.

Фундамент из ФБС изготавливается на специализированных заводах по технологии вибропрессования в соответствии с требованиями ГОСТ. Его производство постоянно находится под контролем фабрики ОТК на предмет геометрических отклонений и других качеств. Блоки изготовлены из бетона, в состав которого входит гранитный щебень, способствующий увеличению прочности, и каркас из арматуры для установки. Производители выпускают только сертифицированную продукцию высокого качества.

Свое приложение фундамент из ФБС встречается как в крупномасштабном строительстве, так и в частном секторе. Применяется для всех типов почв. В зависимости от характера почвы меняется только глубина ее закладки. В наличии ФБС разного веса и размера. В продаже большой ассортимент — блоки раздельные и монолитные для фундамента, столбчатые и ленточные.

Если для фундамента из FBS требуются особые размеров и свойств, производители принимают заявки по индивидуальным заказам.Его установка

осуществляется по технологии кирпичной кладки — производится перевязка швов предыдущих рядов, контролируется правильность расположения блоков относительно друг друга. Особое внимание уделяется первому ряду элементов, которые укладываются на специально подготовленную площадку.

Фундамент из блоков ФБС уложен на цементный раствор с добавлением песка. Для этого можно применить специальный клей, но он намного дороже, поэтому первый вариант более приемлем.Раствор замешивается прямо на площадке. Правильная установка исключает смещение конструкций при движении грунта или грунтовых вод.

Корпус фундамент из ФБС Лента типа начинается с траншеи, которую выкапывают на нужную глубину. Затем его засыпают песком, плотно утрамбовывая, и затем устанавливают всего

блоков. Для строительных работ задействована специальная техника для рытья котлована под фундамент и автокран для укладки блоков, бетономешалка и бригада рабочих.Не забудьте перед началом всех работ об обязательном проектировании и учете всех тонкостей в работе: наличие необходимого количества и качества всех строительных материалов, а также количество и расположение ФБС в строю.

Основным преимуществом такого фундамента является его быстрое возведение, что в строительстве немаловажно. Из этих блоков собирается база разной сложности. Применяется ФБС для строительства многоэтажных многоэтажных домов и небольших по высоте зданий.Малогабаритные изделия производятся для ручного строительства, а тяжелые — для механизированных. Блоки обладают повышенной влаго- и морозостойкостью, экономичностью и прочностью. Они служат более 150 лет.

Влияние добавления среды и последовательного пассирования на транскриптом стромальных клеток, полученных из жировой ткани человека, расширенных in vitro

Характеристика ASC

pHPL-ASC имели более плотную, меньшую вытянутую форму по сравнению с FBS-ASC (Дополнительный файл 1: Рисунок S2).Иммунофенотип FBS-ASC и pHPL-ASC определяли при каждом пассаже. Более 90% имели профиль экспрессии CD44 + CD45-CD73 + CD90 + CD105 +, в то время как менее 2% были CD31 + CD73-CD105-, и это сохранялось до P5 (дополнительный файл 1: рисунок S3). И FBS-ASC, и pHPL-ASC претерпели адипогенез, о чем свидетельствует накопление липидных капель (дополнительный файл 1: Рисунок S4).

Анализ экспрессии генов ASC, расширенных в pHPL и FBS

Для сравнения эффекта pHPL по сравнению с FBS на транскриптом, мы выполнили микроматричный анализ экспрессии генов на ASC, последовательно увеличенных в pHPL или FBS от P0 до P5.Мы обнаружили, что 185, 256, 811, 171, 319 и 349 генов были значительно активированы, в то время как 127, 457, 707, 457, 575 и 567 гены были значительно подавлены в ASC, расширенных в pHPL (pHPL-ASC) по сравнению с FBS ( FBS-ASC) в точках P0, P1, P2, P3, P4 и P5 соответственно (рис. 1; дополнительный файл 1: рисунок S5 и дополнительный файл 2).

Рис. 1

Число дифференциально экспрессируемых генов в pHPL-ASC по сравнению с FBS-ASC при каждом пассаже. Серые и белые полосы представляют гены с повышенной и пониженной регуляцией соответственно в pHPL-ASC по сравнению с FBS-ASC на каждом пассаже.Графики вулканов для этих DEG можно найти в дополнительном файле 1: Рисунок S5)

Функциональный анализ DEG по классификации онтологии генов (GO) показал, что гены, которые были значительно активированы в разных пассажах, были обогащены определенными биологическими процессами (BP). , клеточные компоненты (CC) и молекулярные функции (MF). Здесь будут обсуждаться только 5 основных терминов GO. От P0 до P5 pHPL-ASC были обогащены терминами GO, такими как процессы развития, процессы клеточного цикла, клеточная пролиферация, а также организация внеклеточного матрикса и структуры.FBS-ASC были обогащены терминами GO, такими как пролиферация клеток, адгезия, организация внеклеточного матрикса и структуры, сердечно-сосудистое и сосудистое развитие, морфогенез структуры и другие процессы развития (таблица 1; дополнительный файл 3).

Таблица 1 Лучшие 5 обогащенных терминов GO для pHPL-ASC (с повышенной) и FBS-ASC (с пониженной регуляцией) при каждом пассаже (P0 – P5). Связано с рис.1

Далее мы исследовали влияние последовательного пассирования на экспрессию генов в pHPL-ASC и FBS-ASC, сравнивая экспрессию генов в каждом пассаже с экспрессией в предыдущем пассаже (P1 против P0, P2 против P1, P3 против P2, P4 против P3 и P5 против P4).Для FBS-ASC гены 292, 20, 44, 2 и 9 были значительно активированы, в то время как гены 273, 3, 56, 4 и 3 были значительно подавлены с P0 на P5, соответственно (рис. 2a и дополнительный файл 4). Для pHPL-ASC, 297,182, 22, 3 и 4 гена были значительно активированы, в то время как 46, 360, 27, 3 и 4 гена были значительно подавлены от пассажей P0 до P5, соответственно (рис. 2b и дополнительный файл 5).

Рис. 2

Число дифференциально экспрессируемых генов во время последовательного пассирования FBS-ASC ( a ) или pHPL-ASC ( b ).Серые столбцы над горизонтальной осью — гены с повышенной регуляцией, а белые столбцы под горизонтальной осью — гены с пониженной регуляцией.

Классификация GO активированных генов в FBS-ASC показала, что они были значительно обогащены в отношении миграции и подвижности клеток от P0 к P1, а для P1 — до P2 и P2-P3 были в основном обогащены иммунологическими ответами и процессами. Гены, которые были активированы с P3 на P4 и с P4 на P5, не были обогащены никакими терминами GO (таблица 2; дополнительный файл 6). Гены с пониженной регуляцией от P0 до P1 и от P1 до P2 были обогащены для системных и онтогенетических процессов, в то время как гены от P2 до P3 были обогащены для иммунной субъединицы и сборки белка.Напротив, гены с пониженной регуляцией от P3 до P4 и от P4 до P5 не были обогащены какими-либо терминами GO.

Таблица 2 Лучшие 5 обогащенных терминов GO для значительно повышающей и понижающей регуляции DEG для FBS-ASC между последующими пассажами. Относится к рис. 2a

Для pHPL-ASC термины GO, значительно обогащенные активными генами, включали иммунные ответы от P0 к P1, регуляцию процессов развития и стимульные ответы от P1 к P2, регуляцию связывания РНК и активность фактора транскрипции от P2 до P3 и регуляция сердечно-сосудистых процессов от P3 и P4.Гены, которые были активированы с P4 на P5, не были обогащены ни одним из терминов GO (таблица 3; дополнительный файл 7). Гены с пониженной регуляцией от P1 до P2 были значительно обогащены для процессов клеточного цикла, от P2 до P3 для сердечно-сосудистых процессов, в то время как гены с пониженной регуляцией от P0 до P1, P3 до P4 и P4 до P5 не были обогащены ни для одного члена GO.

Таблица 3 Лучшие 5 обогащенных терминов GO для значительно повышающей и понижающей регуляции DEG для pHPL-ASC между последующими пассажами. Связано с рис. 2b

Далее мы предприняли попытку оценить степень, в которой транскриптом ASC на каждом пассаже (от P1 до P5) отличается от своего исходного состояния (SVF) на P0 при расширении в FBS или pHPL, и функционально охарактеризовать такие изменения с использованием классификации GO.Это было сделано путем сравнения экспрессии гена на каждом пассаже (от P1 до P5) с экспрессией «исходных» засеянных ASC (SVF) в точке P0. Для FBS-ASC гены 292, 514, 591, 685 и 737 были значительно активированы, в то время как гены 273, 288, 350, 427 и 426 были значительно подавлены с P1 на P5 (рис. 3a и дополнительный файл 8). Для pHPL-ASC гены 297, 861, 848, 891 и 863 были значительно активированы, в то время как гены 46, 700, 262, 427 и 523 были значительно подавлены от пассажа P1 к P5 (рис. 3b и дополнительный файл 9).

Рис. 3

Число дифференциально экспрессируемых генов по сравнению с P0 в FBS-ASC ( a ) или pHPL-ASC ( b ). Серые столбцы над горизонтальной осью — гены с повышенной регуляцией, а белые столбцы под горизонтальной осью — гены с пониженной регуляцией.

Термины GO, значительно обогащенные по активированным генам при каждом пассаже (от P1 до P5) по сравнению с P0 в FBS-ASC (Таблица 4; Дополнительные файл 10) или pHPL-ASC (таблица 5; дополнительный файл 11) были специфичны для иммунных реакций и процессов.Термины GO, специфичные для процессов развития, были обогащены генами с пониженной регуляцией в FBS-ASC на каждом пассаже (от P1 до P5) по сравнению с P0 (таблица 4; дополнительный файл 10). Для pHPL-ASC гены с пониженной регуляцией на P1 не были обогащены ни для одного члена GO, в то время как гены всех последующих пассажей (P2-P5) были обогащены для процессов клеточного цикла и процессов развития.

Таблица 4 Лучшие 5 обогащенных терминов GO для значительно повышающей и понижающей регуляции DEG для FBS-ASC между P0 и последующими пассажами.Относится к рис. 3a Таблица 5 Лучшие 5 обогащенных терминов GO для значительно повышающих и понижающих регуляторов DEG для pHPL-ASC между P0 и последующими пассажами. Относится к фиг. 3b.

. Мы наблюдали во время серийного пассирования, что транскриптомный профиль ASC стабилизируется (минимальное изменение DEG между номерами соседних пассажей) от P2 для FBS (фиг. 2a) и P3 для pHPL (фиг. 2b). Это может означать, что культуры ASC более однородны от P2 до P5 и от P3 до P5 при увеличении в FBS и pHPL соответственно.

Из списка DEG, полученных при каждом пассаже (от P1 до P5) по сравнению с P0 для FBS- и pHPL-ASC (дополнительные файлы 8 и 9), мы заметили, что ASC демонстрируют сигнатуры экспрессии генов, которые были уникальными для каждого из них. пассаж (P1 – P5), который не зависел от добавки среды (FBS или pHPL), используемой во время размножения in vitro (дополнительный файл 12). Этот уникальный профиль экспрессии гена, специфичный для пассажа, представляет собой DEG, которые были общими как для pHPL, так и для FBS при каждом номере пассажа.Точно так же, если профиль экспрессии гена, специфичный для пассажа (DEG, общие для FBS- и pHPL-ASC в каждом пассаже), исключен при каждом номере пассажа, оставшиеся DEG представляют собой уникальные профили экспрессии генов, специфичных для пассажа FBS-ASC и pHPL-ASC. (Дополнительный файл 12).

Кроме того, с учетом уникального профиля экспрессии гена, специфичного для пассажа FBS-ASC на всех пассажах (от P1 до P5), их было 37 (AC007879.7, ADAMTS4, ADAMTS9, ALOX5, CCL11, CCL4, CHST1, CLEC5A, COL6A3, CRISPLD2, CTHRC1, DCHS1, DOCK4, FIBIN, GALNT15, HEPH, HEY2, IL3RA, MCTP1, MMP1, NPAS2, PALMD, PIM1, PLAU, PLAUR, PREX1, RGS1, SNAI1, SRPX2, SYTLAD2, TNO TDO2 TNFAIP8L1, WAS и WSB1) и 81 (ADAMTS1, AHNAK2, ALDH7A1, ANKRD1, ANKRD37, ARHGAP29, ARSK, ASAP2, ATP10D, ATP8B1, BAMBI, BCHE, BMP4, BST1ND, C11orf87, CCEP4, BST1ND, C11orf87, CC FAM155A, FAM180A, FAM65B, FGF9, GLRX, GPR133, GPRC5A, GREM1, GREM2, HAPLN1, HSPB6, IGFBP5, IGFBP6, IL1RAPL2, KCTD16, KRT14, KRT18, LIMChL, NCIPAL2, NPC, NPC, NFCAP2, LNSCAP2, NCRT18, LIMCh2, LSCAP2 NLRP10, NOV, NPR3, NR3C2, NRK, NTRK3, OXTR, PAPSS2, PDE1A, PDE1C, PI16, PKP2, PPL, RCAN2, RGS7BP, RHOJ, ROR1, RP11-553 K8.5, RP11-760h32.2, RP11-818F20.5, SAMD12, SBSPON, SDPR, SEMA5A, SLC1A1, SMURF2, STS, SYPL2, TIAM2, TINAGL1, TMEM19, TNFRSF11B, USP53, VEPh2, WEE1 и WNT2), которые были последовательно повышающая или понижающая регулировка соответственно на всех проходах (дополнительный файл 13). Это представляет собой набор генов, которые по-разному экспрессировались в ASC в результате их увеличения в FBS, независимо от числа пассажей клетки. Это может отражать FBS-специфический эффект на транскриптом ASC (профиль экспрессии гена, специфичный для FBS-ASC).Точно так же, глядя на уникальный профиль экспрессии гена, специфичный для пассажа pHPL-ASC на всех пассажах (от P1 до P5), было 32 (A2M, ABLIM1, ADAMTS1, ADCYAP1R1, C10orf10, CHI3L1, EVI2B, F13A1, FAM65B, FST, GALNT12 , HLA-QA1, HLA-DQA2, IL18, IL33, JAG1, MGP, MIR548I2, MT1G, MYCBP2, NTRK2, PCDHB16, PCSK1, PRELP, PRG4, RARRES1, ROR1-AS1, SFRP4, SMPDL и ZPN) и 11 (CDK15, CTHRC1, EHD3, MBOAT2, MIR199A2, MIR503, MIR503HG, NT5DC2, PALLD, PPP2R3A и RP11-08B5.2) генов, которые последовательно повышали или понижали регуляцию соответственно на всех пассажах (дополнительный файл 13).Это представляет собой набор генов, которые по-разному экспрессируются в ASC в результате их увеличения в pHPL, независимо от числа пассажей клетки. Это может отражать специфический для pHPL эффект на транскриптом ASC (профиль экспрессии гена, специфичный для pHPL-ASC).

Таким образом, всего было 118 DEG, которые составили профиль экспрессии FBS-ASC-специфического гена, что почти в 3 раза больше, чем 43 DEG профиля экспрессии pHPL-ASC-специфического гена (дополнительный файл 14).Функциональный анализ сигнатуры экспрессии гена, специфичной для pHPL-ASC, по классификации GO показал, что ни активизирующие, ни отрицательные гены не были обогащены для какого-либо биологического процесса, в то время как сигнатура экспрессии генов, специфичная для FBS-ASC, показала активированные гены, которые были значительно обогащены для миграции клеток и процессы клеточного движения, в то время как гены с пониженной регуляцией были значительно обогащены для регуляции клеточной коммуникации, передачи сигналов и процессов клеточной пролиферации.

Поскольку профиль экспрессии гена, специфичный для пассажа, состоит из общих генов, экспрессируемых как FBS-, так и pHPL-ASC на каждом пассаже, гены, общие для всех этих специфичных для пассажа профилей, будут составлять профиль экспрессии гена ASC, который не зависит от добавления среды или количества пассажей клеток.Существует 69 генов с усиленной регуляцией (AIF1, APCDD1, APLN, APOC1, AQP9, BCL6B, C1orf162, C5AR1, CADM3, CCDC102B, CCR1, CD14, CD37, CD53, CD93, CDH5, CLEC7A, CLIC6, CPM, CSF1R, CSF16R, CSF CXCR4, CXorf36, ECSCR, ELMO1, ENPEP, FCER1G, FPR3, GMFG, GUCY1A3, HPGDS, IL18R1, ITGAM, ITGAX, KDR, KYNU, LAPTM5, LCP1, LCP2, LRRC25, LYVE1, NOT MERTK, NCAAP, NCAPH4, NCAH4 OLFM2, PAG1, PECAM1, PILRA, PLTP, PLVAP, POM121L9P, PPBP, RAMP2, RNASE6, SCG2, SLC11A1, SLC16A10, SPARCL1, SPP1, TM4SF18, TMEM176B, TNFRSF1B и 5 генов, TREMYRO с пониженной регуляцией VSF1B, TREMY4, TREMY4B2 F2RL2, FGF5, GALNT5, RAB3B и SLC9A7), которые составляют эту подгруппу генов, которые последовательно по-разному экспрессировались от P1 до P5.Таким образом, этот набор генов представляет собой уникальный профиль транскриптома ASC in vitro, на который не повлияли ни добавление среды, ни количество клеточных пассажей (дополнительный файл 14). Классификация этих генов GO показала, что они значительно обогащены для нормальных клеточных процессов, таких как реакция на стимул и стресс, защита и воспалительные реакции, а также опосредованный везикулами транспорт.

FBS | NORMA Group

Цельные зажимы — пружинные хомуты для шлангов

1

Номер лота проштампованный

2

NORMA ^® логотип

видимый знак качества

3

Система базового и верхнего покрытия

Двухслойное покрытие без содержания VI без хрома обеспечивает оптимальную защиту от коррозии и химикатов

4

Номинальный диаметр, выбитый на

5

Специальная конструкция

равномерное распределение усилия зажима и отличная округлость

6

Закругленные кромки ленты

Хомуты с пружинной лентой в соотв.с DIN 3021

NORMACLAMP ^® Хомуты с пружинной лентой FBS — идеальный выбор для шланговых систем, которые подвергаются значительным колебаниям температуры. После установки их динамические пружинные свойства обеспечивают эффект автоматического повторного натяжения в течение длительного периода времени. Даже при низких температурах

этот механизм по-прежнему позволяет достичь достаточно высоких уровней радиального зажимного усилия, что, в свою очередь, обеспечивает превосходную надежность уплотнения.С помощью хомутов NORMACLAMP ^® FBS можно надежно соединить даже шланги, которые имеют тенденцию к «ползучести». Для профессионального монтажа используются ручные или пневматические инструменты.

• Цельный хомут для шланга без болтов
• Равномерное распределение зажимного усилия
• Оптимальная округлость
• Температурная стойкость от –40 ° C до 200 ° C
• Автоматическое повторное натяжение для компенсации температурных колебаний
• Четкая прослеживаемость благодаря до номера партии

• Машиностроение
• Бытовая техника
• Сельскохозяйственные машины
• Производство двигателей
• Контуры охлаждающей и нагревающей воды
• Система вентиляции топлива
• Воздуховоды
• Трубопроводы для отвода воды и рассола

Вас также может заинтересовать

Стимулированный гоногенами переход эмбриональных стволовых клеток мыши с усиленным контролем различных путей дифференцировки

Мы стремились вызвать остановку пролиферации в ES-клетках мыши без потери жизнеспособности клеток в отсутствие LIF и βME.В то время как LIF поддерживает наивное состояние плюрипотентности, βME важен для культуры ES-клеток, действуя как внешний антиоксидант. LIF и βME были удалены, чтобы предотвратить помехи потенциальной передаче сигналов, отличной от таковой в ES-клетках. Тестирование различных комбинаций химических веществ показало, что жизнеспособность клеток лучше всего сохраняется при двухступенчатой процедуре химической обработки (рис. 1B и S1). На первом этапе кондиционированные ES (cES) клетки были созданы путем культивирования ES-клеток в присутствии ингибитора ДНК-метилтрансферазы (DNMT) RG108 для снижения геномного метилирования и ингибитора Sirtuin1 (Sirt1) Ex527 для ингибирования активности деацетилазы Sirt1 вместе с LIF. и βME (рис.1Б). На втором этапе (индукция GoST) клетки GoST были созданы путем культивирования клеток cES с электрофильным соединением с окислительно-восстановительным циклом и активатором tBHQ, связанным с ядерным фактором, связанным с эритроидным 2 фактором (Nrf2), в дополнение к RG108 и Ex527, но без LIF и βME. (Рис. 1B) (см. Дополнительную информацию для обоснования индукции GoST).

После индукции GoST клетки выживают в условиях, лишенных LIF и βME.

Для изучения природы клеток GoST мы сравнили жизнеспособность клеток GoST и ES-клеток, которые культивировали в отсутствие LIF и βME в течение 7 дней с помощью двойного окрашивание 7-AAD и аннексином V (рис.2А). В то время как ES-клетки, лишенные LIF и βME, демонстрировали массовую гибель клеток (жизнеспособность 10,8% клеток), жизнеспособность клеток GoST в основном сохранялась (61,1% жизнеспособности клеток) по сравнению с клетками cES (жизнеспособность 70,1% клеток) и ES-клетками, выращенными в присутствие LIF и βME (жизнеспособность клеток 69,5%) (рис. 2А). В культурах ES-клеток, лишенных LIF и βME, большинство выживших клеток имело удлиненную клеточную форму, что указывает на дифференцировку (рис. 2B). Напротив, большинство клеток в культурах клеток GoST все еще демонстрировали морфологию, аналогичную недифференцированным ES-клеткам (рис.2Б). В другом исследовании было показано, что культивирование ES-клеток невозможно без внешнего антиоксиданта ²⁶. Наше открытие, что клетки GoST выживали в отсутствие βME, означало, что они не были ES-клетками.

Фигура 2: клетки GoST выживают в условиях, лишенных LIF и βME, и демонстрируют сниженную пролиферацию с остановкой фазы G1 / S по сравнению с клетками ES.

( A ) Проточно-цитометрический анализ жизнеспособности клеток с помощью окрашивания 7-AAD / аннексином V для клеток cES (зеленый), клеток GoST (темно-синий), клеток ES (белый) и клеток ES, подвергнутых 7-дневному воздействию LIF и Вывод βME (белый).Жизнеспособные клетки расположены в нижнем левом квадранте графиков 7-AAD / Аннексин V. Через 7 дней клетки GoST показали значительно более высокую жизнеспособность (61,1%) по сравнению с клетками ES (10,8%). ( B ) Фазово-контрастные изображения клеточных колоний. На 7-й день отмены LIF и βME ES-клетки были в основном мертвыми и остались только очень плоские или удлиненные клетки, тогда как GoST-клетки на 7-й день все еще можно было наблюдать в клеточных колониях с морфологией, аналогичной ES-клеткам, на 0-й день. Шкала шкалы = 50 мкм. ( C ) Двухпараметрический график включения EdU (6-часовой импульс EdU) и содержания ДНК (DAPI).Доля клеток EdU + была ниже при индукции GoST (61,7%) по сравнению с клетками ES и клетками cES (98,9%). Клетки EdU + имели в 3 раза меньшую среднюю интенсивность EdU при индукции GoST по сравнению с клетками EdU + ES или клетками cES (показаны на нижней правой гистограмме). ( D ) Флуоресцентные изображения включения EdU (красный). ДНК контрастировали с DAPI (синий). После индукции GoST интенсивность сигнала EdU снижалась, в то время как некоторые клетки внутри и вне колоний не демонстрировали сигнала EdU.Масштабная линейка = 100 мкм. ( E ) Проточно-цитометрический анализ распределения клеточного цикла путем измерения содержания ДНК. После индукции GoST фаза G0 / G1 увеличивалась, а фаза G2 / M уменьшалась, что подразумевает остановку фазы G1 / S. ДНК окрашивали 7AAD. ( F ) Вестерн-блоттинг белков, регулирующих клеточный цикл. После индукции GoST экспрессия циклина D1 и циклина B1 снижалась. Данные вестерн-блоттинга были нормализованы по α-тубулину. Жизнеспособность клеток, включение EdU, клеточный цикл и данные вестерн-блоттинга были получены в трех независимых экспериментах.Планки погрешностей соответствуют S.E.M. Одна звездочка представляет p <0,05, а три звезды представляют p <0,001. См. Рисунки S1 и S2.

tBHQ, как известно, активирует передачу сигналов Nrf2, которая в основном способствует выживанию клеток ²⁷ (рис. S2). Поэтому мы проанализировали экспрессию генов-мишеней Nrf2, участвующих в системах генерации антиоксидантов и НАДФН (рис. S2). Как и ожидалось, экспрессия всех генов-мишеней антиоксидантов Nrf2 и большинства генов-мишеней, участвующих в генерации NADPH, увеличивалась после индукции GoST (рис.S2). Иммунофлуоресценция Nrf2 показала, что через 2 дня индукции GoST, Nrf2 истощился в цитоплазме клеток GoST по сравнению с ES-клетками, выращенными без LIF и βME в течение 2 дней, что указывает на транслокацию Nrf2 из цитоплазмы в ядро в клетках GoST (рис. S2). ). В целом, эти результаты предполагают, что выживание клеток GoST в условиях, лишенных βME, было спасено активацией генов-мишеней Nrf2 (см. Дополнительную информацию для анализа метаболических маркеров).

В клетках GoST снижена пролиферация клеток

Затем мы проанализировали пролиферацию клеток путем измерения включения EdU (рис.2C, D) и дополнительно путем количественной оценки уровней экспрессии циклина D1 и B1 (фиг. 2F). Клетки ES и клетки cES демонстрировали очень высокие и неразличимые уровни включения EdU (98,9% клеток EdU +) и, по-видимому, задерживались в фазе G1 (фиг. 2C) из-за токсичности из-за высокого включения EdU. Это означало, что клетки ES и клетки cES имели очень высокую скорость пролиферации (рис. 2C, D). Напротив, после индукции GoST прогрессирование клеточного цикла в присутствии EdU все еще наблюдалось, но количество клеток, включающих EdU, было ниже (61.7% клеток EdU +) (рис. 2С). Кроме того, клетки EdU + GoST показали в 3 раза меньшую среднюю интенсивность EdU по сравнению с клетками EdU + ES или клетками cES (фиг. 2C). В целом, эти результаты означают, что после индукции GoST фракция пролиферативных клеток снижалась и что пролиферирующие клетки демонстрировали пониженную скорость синтеза ДНК. Подтверждая это наблюдение, экспрессия циклина D1 и B1 снижалась после индукции GoST (фиг. 2F).

Клетки GoST испытывают остановку фазы G1 / S с повышающей регуляцией специфического для фазы G1 / S ингибитора CDK p27

Распределение клеточного цикла анализировали путем измерения содержания ДНК в клетках с окрашиванием 7-AAD (рис.2E). ES-клетки и cES-клетки показали типичное распределение клеточного цикла, описанное для ES-клеток ²⁸, с примерно 16% в фазе G0 / G1, 16% в фазе G2 / M и 67% в фазе S (фиг. 2E). Интересно, что клетки GoST показали довольно отчетливое распределение клеточного цикла с примерно 28% в фазе G0 / G1, 7% в фазе G2 / M и 64% в фазе S (рис. 2E). После индукции GoST фаза G0 / G1 увеличивалась, а фаза G2 / M снижалась, что подразумевает активацию контрольной точки клеточного цикла G1 / S (рис. 2E).

Анализ экспрессии генов ингибиторов CDK показал, что экспрессия p15 , p16 , p21 и p27 постепенно увеличивалась, в то время как экспрессия p57 не показывала явного увеличения при индукции GoST ( Рис. 3A). p27 специфичен для фазы G1 / S и участвует в самых ранних стадиях остановки митоза во время индукции гоноцитов на E12.5-13.5 ¹⁷ (Fig. 1A). Количественная оценка уровней экспрессии p27 показала увеличение при индукции GoST (рис.3Б). Иммунофлуоресценция также показала, что в культурах клеток GoST экспрессия p27 была увеличена в клетках, расположенных внутри колоний, по сравнению с клетками ES и клетками cES (рис. 3C). В целом, эти результаты предполагают, что p27 участвует в стимулировании остановки фазы G1 / S в клетках GoST.

Рисунок 3: клетки GoST повышают экспрессию p27, но сохраняют экспрессию основных маркеров плюрипотентности по сравнению с клетками ES.

( A ) ПЦР-анализ маркеров ингибиторов CDK в реальном времени.После индукции GoST повышалась экспрессия p15 , p16 , p21 и p27 . ( B ) Вестерн-блоттинг p27. После индукции GoST экспрессия p27 увеличивалась. ( C ) Иммунофлуоресценция p27 (красный). ДНК контрастировали с DAPI (синий). После индукции GoST экспрессия p27 увеличивалась в клетках, растущих в колониях. Масштабная линейка = 50 мкм. ( D ) ПЦР-анализ основных маркеров плюрипотентности в реальном времени. После индукции GoST экспрессия основных маркеров плюрипотентности оставалась в основном неизменной, в то время как экспрессия Nanog и Tbx3 повышалась.( E ) Иммунофлуоресценция Nanog, Oct4, Sox2 и ALP (красный). ДНК контрастировали с DAPI (синий). После индукции GoST клетки продолжали экспрессировать Nanog, Oct4, Sox2 и ALP. Масштабная линейка = 50 мкм. ( F ) Вестерн-блоттинг Nanog, Oct4 и Sox2. После индукции GoST экспрессия Nanog, Oct4 и Sox2 показала лишь небольшое снижение и оставалась на аналогичных уровнях. Данные ПЦР в реальном времени были нормализованы до Gapdh и получены из дубликатов двух независимых экспериментов.Данные вестерн-блоттинга были нормализованы по α-тубулину и получены в трех независимых экспериментах. Планки погрешностей соответствуют S.E.M. Две звезды представляют p <0,01, а три звезды представляют p <0,001. См. Рисунок S3.

Клетки GoST сохраняют экспрессию основных маркеров плюрипотентности, что исключает возможность соматической дифференцировки

Предыдущие исследования показали, что повышенная экспрессия p27 в ES-клетках коррелирует с потерей маркеров плюрипотентности ²⁹. Следовательно, мы проверили экспрессию маркеров плюрипотентности и показали, что они оставались на аналогичных уровнях ( Oct4 , Sox2 , Esrrb , Nr5a2 и Klf4 ) или были увеличены ( Nanog x3 и T ) (Рис.3D). Кроме того, иммунофлуоресценция показала, что Nanog, Oct4, Sox2 и щелочная фосфатаза (ЩФ) все еще экспрессируются в клетках GoST (рис. 3E). Экспрессия Nanog, Oct4 и Sox2 также была определена количественно, подтверждая, что все три основных маркера плюрипотентности оставались на сходных уровнях после индукции GoST (фиг. 3F). В целом, обнаружение высоких уровней экспрессии основных маркеров плюрипотентности, сопровождающихся повышающей регуляцией p27 и остановкой фазы G1 / S, примечательно, и, согласно нашим знаниям, никогда не сообщалось до in vitro .

Поскольку LIF был удален из культуральной среды во время индукции GoST, мы ожидали снижения LIF нижестоящей целевой передачи сигналов Stat3 ³⁰. Вестерн-блоттинг подтвердил, что отношение фосфорилированного к общему количеству Stat3 (P-Stat3 / T-Stat3) снижалось после индукции GoST (фиг. S3). Уменьшение P-Stat3 / T-Stat3 вместе с повышенной экспрессией p27 подразумевает, что нельзя предполагать наивную плюрипотентность, как она проявляется в ES-клетках. Экспрессия основных маркеров плюрипотентности подразумевает, что клетки GoST не дифференцировались по соматической судьбе.

Уровни экспрессии Dazl различают две разные клеточные популяции.

Экспрессия генов, специфичных для наивной плюрипотентности ³¹, оставалась на аналогичных уровнях между ES-клетками и cES-клетками для всех протестированных генов наивной плюрипотентности (рис. 4A). После индукции GoST экспрессия большинства протестированных генов оставалась на аналогичных уровнях, включая Dppa3 , Stra8 , Prdm14 , Rex1 , Dax1 и Fbxo15 (рис.4А). Однако экспрессия Piwil2 и Dazl была увеличена (фиг. 4A). Piwil2 , как сообщается, специфически активируется во время индукции мужских гоноцитов между E12.5 и E14.5 ³², и его повышенная экспрессия предполагает наличие процессов, специфичных для половых клеток.

Рис. 4. Экспрессия генов, специфичных для зародышевых клеток, модулируется в клетках GoST, что указывает на индукцию гоноцитов.

( A ) ПЦР-анализ наивных маркеров плюрипотентности в реальном времени.После индукции GoST экспрессия Dazl и Piwil2 увеличивалась, в то время как экспрессия всех других маркеров оставалась неизменной. ( B ) ПЦР-анализ маркеров половых клеток в реальном времени. После индукции GoST экспрессия маркеров зародышевых клеток увеличивалась, за исключением экспрессии Tex101 , которая оставалась неизменной. ( C ) Иммунофлуоресценция Dazl и Nanos2 (красный). ДНК контрастировали с DAPI (синий). ES-клетки и cES-клетки показали ядерную и цитоплазматическую экспрессию Dazl в клеточных колониях, в то время как некоторые клетки внутри колоний очень сильно экспрессировали Dazl в цитоплазме.После индукции GoST все клетки, расположенные в многоклеточных колониях, продолжали экспрессировать Dazl на том же уровне, что и ES-клетки с низкой экспрессией Dazl в ядре и цитоплазме, в то время как очень большие клетки с сильно увеличенной экспрессией цитоплазматического Dazl появлялись вокруг клеточных колоний. Белые стрелки указывают на клетки с сильной цитоплазматической экспрессией Dazl. Nanos2 экспрессировался в ES-клетках, cES-клетках и GoST-клетках и появлялся в форме цитоплазматических круглых телец, как показано на увеличенных изображениях (из белых квадратов).Размер тел Nanos2 был уменьшен в клетках cES по сравнению с клетками ES, но увеличился в клетках GoST по сравнению с клетками ES. Желтые стрелки указывают на тела Nanos2. Масштабная шкала = 50 мкм для верхних изображений Dazl и Nanos2 и масштабная линейка = 5 мкм для увеличенных изображений. ( D ) Вестерн-блоттинг Dazl и Nanos2. После индукции GoST экспрессия Dazl и Nanos2 увеличивалась. Данные ПЦР в реальном времени были нормализованы до Gapdh и получены из дубликатов двух независимых экспериментов. Данные вестерн-блоттинга были нормализованы по α-тубулину и получены в трех независимых экспериментах.Планки погрешностей соответствуют S.E.M. Одна звездочка представляет p <0,05, две звезды представляют p <0,01 и три звезды представляют p <0,001. См. Рис. S4.

Сообщалось, что дазл сильно активируется во время мейоза ³³, а не во время индукции гоноцитов, хотя его экспрессия на низком уровне, как сообщается, важна для индукции гоноцитов ¹¹. Вестерн-блоттинг показал, что Dazl сильно увеличивался после индукции GoST (фиг. 4D). Иммунофлуоресценция показала экспрессию Dazl во всех ES-клетках и cES-клетках, в то время как некоторые клетки в колониях сильно экспрессировали Dazl в цитоплазме (рис.4С, белые стрелки). Интересно, что после индукции GoST все клетки, расположенные в колониях, экспрессировали Dazl на низком уровне, аналогичном ES-клеткам, в то время как вокруг колоний появлялись гораздо более крупные клетки с сильно увеличенной экспрессией Dazl в цитоплазме (рис. 4C). Эти результаты предполагают, что клетки GoST демонстрируют низкую экспрессию Dazl и физически отделяются от сильно увеличенных клеток, которые демонстрируют высокую экспрессию Dazl. Поразительно большая и плоская морфология клеток с высокой экспрессией Dazl указывает на фенотип, подобный старению.Наши результаты свидетельствуют о немейотической функции Dazl в клетках GoST.

Гены, специфичные для индукции гоноцитов, активируются при индукции GoST

Затем мы проанализировали экспрессию генов, специфичных для примированной плюрипотентности, обычно экспрессируемых стволовыми клетками эпибласта ¹ (фиг. S4). Экспрессия Nodal и Eomes была увеличена в течение всего курса индукции GoST, тогда как экспрессия Gata6 , Foxa2 , Cer1 , Sox17 , T и Fgf5 показала замедленное увеличение.Повышенная экспрессия Nodal ³⁴ и Eomes ³⁵ согласуется с возможностью индукции гоноцитов (рис. S4), в то время как роль других праймированных маркеров плюрипотентности остается неясной из-за отсутствия научной литературы. изучение этих генов в гоноцитах. Также возможно, что некоторые маркеры зародышевого листка не были связаны с клетками GoST, но экспрессировались в других популяциях клеток, присутствующих в культуре клеток GoST. Затем мы проанализировали экспрессию генов, более специфичных для индукции гоноцитов на E12.5–13,5 ^15,36,37 (рис. 4B). Экспрессия Cxcr4 на клеточной поверхности подавляется в первых постмиграционных гоноцитах, начиная с E13.5 и далее ²³. Экспрессия Tex101 маркирует гоноциты начиная с E14-16 и далее, но не экспрессируется ранее ²⁴ (Fig. 1A). Экспрессия была сходной между ES-клетками и cES-клетками для всех тестируемых генов (фиг. 4B). Однако экспрессия всех протестированных генов, специфичных для индукции гоноцитов на E12.5–13.5 ( Nanos2 , Tdrd1 , Ddx4 , Zbtb16 и Plk1s1 ), увеличивалась при индукции GoST (рис.4Б). Мы также измерили повышенную экспрессию Cxcr4 (фиг. 4B). Однако в другом исследовании было показано, что в мононуклеарных клетках костного мозга экспрессия Cxcr4 посттранскрипционно контролируется микроРНК ³⁸. Следовательно, изменения в экспрессии Cxcr4 могут не коррелировать с экспрессией его белка. Как и ожидалось, экспрессия Tex101 не показывала явного увеличения при индукции GoST (фиг. 4B). Эти результаты подтверждают мнение, что индукция GoST in vitro продуцирует некоторые молекулярные маркеры индукции гоноцитов в мужских половых железах на E12.5–13.5.

Экспрессия Nanos2 повышена в клетках GoST

Поскольку Nanos2 является важным фактором индукции мужских гоноцитов, и его уровни мРНК повышались после индукции GoST, мы дополнительно исследовали экспрессию Nanos2 (рис. 4C, D). Вестерн-блот-анализ показал, что экспрессия Nanos2 увеличивалась после индукции GoST (фиг. 4D). Иммунофлуоресценция показала, что Nanos2 экспрессируется в форме круглых телец внутри ES, cES и GoST клеток (рис. 4C). Интересно, что некоторые из тел Nanos2 в клетках GoST были намного больше, чем в клетках ES и клетках cES (рис.4C, увеличенные изображения, желтые стрелки), предполагая, что активность Nanos2 была увеличена в клетках GoST. Сообщалось, что повышенная активность Nanos2 коррелировала с увеличением количества и размера P-тел, в которых находился Nanos2 ³⁶. Повышенная экспрессия и активность Nanos2 является очень специфическим и важным молекулярным маркером индукции мужских гоноцитов на E12.5-13.5 ¹⁵ (Fig. 1A). Насколько нам известно, это первый случай, когда активация Nanos2 может быть стимулирована в мышиных ES-клетках in vitro без генетических манипуляций.

Клетки GoST развиваются в клетки, экспрессирующие Tex101, после высвобождения из индукции GoST

Затем мы спросили, будут ли клетки GoST дифференцироваться в клетки с молекулярными маркерами гоноцитов, определяемыми здесь как клетки, подобные гоноцитам GoST (GoST-GL), когда условия культивирования, которые индуцируют GoST, удаляются. Мы искали экспрессию Tex101, маркера гоноцитов, начиная с E14-16 (фиг. 1A).

Для этого мы культивировали клетки GoST в течение более длительного периода времени (12 дней) в присутствии только βME (рис.5А). Затем мы проанализировали экспрессию всех генов, ранее протестированных во время индукции GoST, и наиболее заметные результаты были следующими: сразу же увеличилась экспрессия Tex101 и Dppa3 (рис. 5B, C), уменьшилась Nanog , Oct4 , . Sox2 , Esrrb , Nr5a2 , Klf4 и экспрессия Tbx3 (рис. S5), увеличилась экспрессия p27 , p57 и Zbtb16 на 12-й день (рис.S5 и 5C) и увеличили экспрессию Stra8 и Dazl на 12 день (фиг. 5B). Повышенная экспрессия Tex101 и Dppa3 предполагала появление клеток с молекулярными маркерами гоноцитов после E14 ^24,39. Эта точка зрения подтверждается сниженной экспрессией Nanog , Oct4 , Sox2 , Esrrb , Nr5a2 , Klf4 и Tbx3 , поскольку основные маркеры плюрипотентности 1414 подавляются 40 во время созревания гена ^{во время созревания гона.Повышенная экспрессия p27 , p57 и Zbtb16 на 12-й день также подтверждает эту точку зрения, поскольку p27 и Zbtb16 продолжают экспрессироваться в гоноцитах после E13.5, тогда как p57 активируется с E14.5. и далее ¹⁷. Повышенная экспрессия Stra8 и Dazl на 12 день, оба из которых являются мейотическими генами, предполагала появление мейотических клеток в этот поздний момент времени. Это также согласуется с теорией индукции гоноцитов, поскольку известно, что во время пресперматогенеза часть развивающихся гоноцитов претерпевает мейотическую дифференцировку и апоптоз ⁴¹.}

Фигура 5: Появление клеток, экспрессирующих гоноцит-специфический маркер Tex101, после высвобождения в результате индукции GoST.

( A ) Схематическое изображение высвобождения в результате индукции GoST, ведущего к гоногенной дифференцировке клеток GoST (темно-синий) в клетки GoST-GL (светло-синий) с молекулярными маркерами гоноцитов на ст. E13,5–14 ( маркеры см. на рис. 1А). Клетки GoST культивировали в присутствии βМЕ без дополнительной стимуляции в течение 12 дней. ( B ) ПЦР-анализ наивных маркеров плюрипотентности в реальном времени после высвобождения после индукции GoST.После высвобождения в результате индукции GoST экспрессия Dppa3 , Stra8 и Fbxo15 была увеличена, экспрессия Dazl оставалась неизменной и только увеличивалась на 12 день, экспрессия Piwil2 , Prdm14 и Rex был немного снижен, и экспрессия Dax1 была сильно снижена. ( C ) ПЦР-анализ в реальном времени маркеров зародышевых клеток после высвобождения в результате индукции GoST. После высвобождения из индукции GoST экспрессия Tex101 была увеличена, экспрессия Cxcr4 осталась неизменной и увеличилась только на 12 день, экспрессия Zbtb16 сначала снизилась и снова увеличилась на 12 день, экспрессия Plk1s1, и Ddx4 остался неизменным, а экспрессия Nanos2 и Tdrd1 была снижена.( D ) Иммунофлуоресценция Tex101 (красные, белые стрелки) и Dppa3 (зеленые) после высвобождения в результате индукции GoST. ДНК контрастировали с DAPI (синий). Клетки, экспрессирующие Tex101, выявляли через 4, 8 и 12 дней после высвобождения из индукции GoST, но не могли быть обнаружены в клетках ES, клетках cES или клетках GoST. Увеличенные изображения (из белых квадратов) показали, что Tex101 был связан с клеточной мембраной. Одновременное обнаружение Tex101 и Dppa3 показало, что Dppa3 экспрессируется в ES-клетках, cES-клетках, GoST-клетках и в GoST-GL-клетках, экспрессирующих Tex101.Масштабная линейка = 50 мкм для верхних изображений Tex101 и масштабная линейка = 5 мкм для изображений с увеличением Tex101 и изображений одновременного обнаружения Tex101-Dppa3. Данные ПЦР в реальном времени были нормализованы до Gapdh и получены из дубликатов двух независимых экспериментов. Планки погрешностей соответствуют S.E.M. Две звезды представляют p <0,01, а три звезды представляют p <0,001. Данные на 7-й день служили эталоном и идентичны данным графиков индукции GoST (рис. 4). См. Рисунок S5.

Поразительно, что анализ экспрессии Tex101 и Dppa3 с помощью иммунофлуоресценции обнаружил некоторые клетки, экспрессирующие Tex101, на 4, 8 и 12 дней после высвобождения после индукции GoST (рис.5D, белые стрелки), в то время как большинство клеток оставалось Tex101-отрицательным. Tex101 был связан с клеточной мембраной в Tex101-экспрессирующих клетках GoST-GL (фиг. 5D, увеличенные изображения), подтверждая, что субклеточная локализация является физиологической ⁴². Кроме того, Dppa3 был обнаружен в этих клетках GoST-GL, как и в клетках GoST, cES и ES (фиг. 5D). Важно отметить, что Dppa3 был обнаружен во всех клетках, экспрессирующих Tex101. В отличие от Tex101 , Dppa3 не экспрессируется в сперматоцитах ³⁹, что исключало возможность того, что экспрессирующие Tex101 клетки GoST-GL напоминали сперматоциты.Насколько нам известно, это первый случай, когда Tex101-экспрессирующие клетки с некоторыми маркерами ранних гоноцитов были созданы из мышиных ES-клеток in vitro .

Клетки GoST подавляют экспрессию Cxcr4 и SSEA1, но продолжают экспрессировать TRA98 после выхода из индукции GoST

В связи с тем, что Tex101 экспрессировался только в некоторых клетках, мы предположили, что большинство Tex101-отрицательных клеток будут демонстрировать некоторые молекулярные маркеры гоноцитов. с более ранней стадии, чем E14.Подавление Cxcr4 начиная с E13.5 и далее представляет собой очень ранний молекулярный маркер постмиграционных гоноцитов ²³, в то время как подавление SSEA1 от E12.5-15 и далее представляет собой еще один молекулярный маркер во время раннего развития гоноцитов с менее четко определенным временным окном ^{20, 21} (рис. 1А). Кроме того, TRA98 экспрессируется наивными клетками PS и зародышевой линией, включая PGC и гоноциты ^7,12,13, но не соматическими клетками. Насколько нам известно, также не сообщалось об экспрессии TRA98 в клетках постимплантационного эпибласта.Следовательно, TRA98 представляет собой очень специфический маркер для обнаружения широкого спектра типов зародышевых клеток (рис. 1А).

Одновременное обнаружение Cxcr4 и SSEA1 методом иммунофлуоресценции подтвердило эту гипотезу. Хотя экспрессия Cxcr4 была высокой в клетках ES и cES, она оказалась более гетерогенной, распределенной в клетках GoST (фиг. 6A). Важно отметить, что экспрессия Cxcr4 подавлялась в большинстве клеток через 4, 8 и 12 дней после высвобождения после индукции GoST (фиг. 6A). Экспрессия SSEA1 была высокой в клетках ES, cES и GoST, а также в большинстве клеток через 4 дня, но снизилась через 8 и 12 дней после высвобождения (рис.6А).

Рисунок 6: Подавление Cxcr4, SSEA1 и экспрессии TRA98 после высвобождения из индукции GoST.
( A ) Иммунофлуоресценция Cxcr4 (белый) и SSEA1 (зеленый) после высвобождения в результате индукции GoST. Cxcr4 и SSEA1 были обнаружены одновременно. ДНК контрастировали с DAPI (синий). Cxcr4 и SSEA1 экспрессировались в клетках ES, cES и GoST. Cxcr4 подавлялся через 4, 8 и 12 дней после высвобождения из индукции GoST, тогда как SSEA1 оставался экспрессированным до 4 дней после высвобождения из индукции GoST и затем подавлялся через 8 и 12 дней после высвобождения.Масштабная линейка = 50 мкм. ( B ) Иммунофлуоресценция TRA98 (белый) и SSEA1 (зеленый) после высвобождения в результате индукции GoST. TRA98 и SSEA1 были обнаружены одновременно. ДНК контрастировали с DAPI (синий). TRA98 и SSEA1 экспрессировались в клетках ES, cES и GoST. Экспрессия TRA98 немного снижалась, но оставалась определяемой в ядре через 4, 8 и 12 дней после высвобождения после индукции GoST, в то время как SSEA1 оставался экспрессированным до 4 дней после высвобождения из индукции GoST и затем подавлялся через 8 и 12 дней после высвобождения.Масштабная линейка = 50 мкм. См. Рис. S6.
Экспрессия TRA98 была обнаружена в клетках ES, cES и GoST (фиг. 6B). Хотя экспрессия TRA98 была слабее через 4, 8 и 12 дней после высвобождения после индукции GoST, она все еще обнаруживалась в ядре большинства клеток (фиг. 6B). Одновременное обнаружение SSEA1 ясно показало, что TRA98 оставался экспрессированным, в то время как SSEA1 подавлялся в тех же клетках через 8 и 12 дней после высвобождения (фиг. 6B). В контрольном эксперименте SSEA1 и TRA98 не обнаруживались в эмбриональных фибробластах мыши (MEF), тогда как ES-клетки экспрессировали оба маркера (рис.S6). Однако Cxcr4 был обнаружен как в ES клетках, так и в MEF в нашем контрольном эксперименте (Fig. S6), что подтверждено в литературе ⁴³. Широкая экспрессия TRA98 после высвобождения в результате индукции GoST четко выявила идентичность зародышевых клеток, за исключением примированной плюрипотентности и соматической дифференцировки. Подавление SSEA1 в тех же клетках исключало наивную плюрипотентность. В целом, подавление SSEA1 в TRA98-экспрессирующих клетках и более раннее подавление Cxcr4 предполагают паттерн молекулярных маркеров, типичный для индукции гоноцитов (рис.1А).
GoST-клетки демонстрируют равный или лучший потенциал многолинейной дифференцировки
in vitro по сравнению с ES-клетками
Затем мы спросили, как in vitro многолинейный потенциал дифференцировки клеток GoST по сравнению с ES-клетками. Мы протестировали нейрогенный, кардиогенный и гепатогенный потенциал дифференцировки GoST-клеток по сравнению с ES-клетками с использованием химических индукторов TCS2210 ⁴⁴, Icariin ⁴⁵ и SJA710-6 ⁴⁶ соответственно (рис.7А, Г, Ж). Мы описали полученные клетки как клетки GoST, подобные нейрогенным (GoST-NL) и клетки ES-NL, клетки GoST, подобные кардиогенным (GoST-CL) и клетки ES-CL, и клетки GoST, подобные гепатогенам (GoST-HL), и Клетки ES-HL (фиг. 7A, D, G).
Фигура 7. Клетки GoST демонстрируют равный или лучший потенциал многолинейной дифференцировки in vitro по сравнению с ES-клетками.
( A ) Схематическое изображение нейрогенной дифференцировки GoST-клеток (темно-синий) и ES-клеток (белый) в GoST-NL-клетки (оранжевые) и ES-NL-клетки (белые) в течение 12 дней соответственно.( B ) ПЦР-анализ нейрогенных маркеров в реальном времени. Экспрессия Nes , Chrna2 , Zcchc12 , Eno2 и Npy была увеличена в клетках GoST-NL и ES-NL. ( C ) Иммунофлуоресценция нестина (красный). Клетки, экспрессирующие нестин, были обнаружены в клетках GoST-NL и ES-NL. Недифференцированные клетки ES (день 0) уже показали сильное окрашивание на нестин, в то время как недифференцированные клетки GoST, растущие в колониях (день 7), не показали сигнала нестина.Некоторые крупные клетки, окружающие колонии клеток GoST, были окрашены положительно на нестин. Масштабная линейка = 50 мкм. ( D ) Схематическое изображение кардиогенной дифференцировки клеток GoST (темно-синий) и ES-клеток (белый) в клетки GoST-CL (розовые) и клетки ES-CL (белые) в течение 12 дней соответственно. ( E ) ПЦР-анализ кардиогенных маркеров в реальном времени. Экспрессия Gata4 , Nkx2.5 , Mef2c , Mlc2v и αMhc была увеличена в клетках GoST-CL, но только экспрессия Gata4 и Nkx2.5 был увеличен в клетках ES-CL. ( F ) Иммунофлуоресценция сердечного Mhc (красный). Клетки, экспрессирующие Mhc, были обнаружены в клетках GoST-CL, но не в клетках ES-CL. Масштабная линейка = 50 мкм. ( G ) Схематическое изображение гепатогенной дифференцировки клеток GoST (темно-синий) и ES-клеток (белый) в клетки GoST-HL (коричневые) и клетки ES-HL (белые) в течение 12 дней соответственно. ( H ) ПЦР-анализ гепатогенных маркеров в реальном времени. Экспрессия Afp , Hnf4a , Alb и Cyp1a1 была увеличена в клетках GoST-HL, но была увеличена только экспрессия Afp , Cyp1a1 и в меньшей степени Hnf4a . клетки.( I ) Иммунофлуоресценция Hnf4a (красный). Клетки, экспрессирующие Hnf4a, локализованные в ядрах клеток, были обнаружены в клетках GoST-HL, но не в клетках ES-HL. Масштабная линейка = 50 мкм. ДНК контрастировали с DAPI (синий). Данные ПЦР в реальном времени были нормализованы до Gapdh и получены из дубликатов двух независимых экспериментов. Планки погрешностей соответствуют S.E.M. Одна звездочка представляет p <0,05, две звезды представляют p <0,01 и три звезды представляют p <0,001. См. Рис. S7.
При нейрогенной дифференцировке экспрессия нейрогенных маркеров ( Nes , Chrna2 , Zcchc12 , Eno2 и Npy ) была увеличена как в клетках GoST-NL, так и в ES-NL в одинаковой степени (рис.7Б). Иммунофлуоресценция маркера ранней нейральной дифференцировки Nestin показала, что она была увеличена в клетках GoST-NL и ES-NL (фиг. 7C). Эти результаты предполагают, что клетки GoST и ES-клетки обладают сходным потенциалом дифференцировки в направлении нейрогенного происхождения. Интересно, что экспрессия Nes , Chrna2 , Zcchc12 и Npy была ниже в недифференцированных клетках GoST по сравнению с недифференцированными клетками ES (фиг. 7B). Нестин умеренно экспрессировался в недифференцированных ES-клетках, но его экспрессия была намного слабее в недифференцированных GoST-клетках (рис.7C). Оказалось, что во время индукции GoST нейрогенная дифференцировка сильно подавлялась, хотя позже она могла быть стимулирована химической индукцией.
После кардиогенной дифференцировки экспрессия всех кардиогенных маркеров ( Gata4 , Nkx2.5 , Mef2c , Mlc2v и αMhc ) была увеличена в клетках GoST-CL, но только экспрессия Gata4 Nkx2.5 был увеличен в клетках ES-CL (фиг. 7E). Кроме того, иммунофлуоресценция показала, что тяжелая цепь сердечного миозина (Mhc) выявлялась в клетках GoST-CL, но не в клетках ES-CL (рис.7F). Кроме того, спонтанно бьющиеся кластеры клеток выявлялись в клетках GoST-CL уже через 8 дней после кардиогенной дифференцировки, в то время как в клетках ES-CL не обнаруживались бьющиеся клетки в любой момент времени (Mov. S1). Эти результаты предполагают, что клетки GoST обладают повышенным потенциалом дифференцировки в отношении кардиогенных клонов по сравнению с клетками ES.
При гепатогенной дифференцировке экспрессия ранних гепатогенных маркеров ( Afp , Hnf4a , Alb и Cyp1a1 ) была увеличена в клетках GoST-HL, в то время как экспрессия только Afp и Cyp1a1 была увеличена. в клетках ES-HL (рис.7H). Иммунофлуоресценция показала, что ранний гепатогенный маркер Hnf4a экспрессируется в некоторых клетках GoST-HL и локализуется в ядрах клеток, но не экспрессируется в клетках ES-HL (фиг. 7I и S7). Эти результаты предполагают, что клетки GoST обладают повышенным потенциалом дифференцировки в отношении ранних гепатогенных клонов по сравнению с клетками ES.
Таким образом, по сравнению с клетками ES in vitro , клетки GoST показали равный потенциал нейрогенной дифференцировки, в то время как их потенциал кардиогенной и гепатогенной дифференцировки был увеличен.
SEC.gov | Превышен порог скорости запросов
Чтобы обеспечить равный доступ для всех пользователей, SEC оставляет за собой право ограничивать запросы, исходящие от необъявленных автоматизированных инструментов. Ваш запрос был идентифицирован как часть сети автоматизированных инструментов за пределами допустимой политики и будет обрабатываться до тех пор, пока не будут приняты меры по объявлению вашего трафика.
Укажите свой трафик, обновив свой пользовательский агент, включив в него информацию о компании.
Для лучших практик по эффективной загрузке информации из SEC.gov, включая последние документы EDGAR, посетите sec.gov/developer. Вы также можете подписаться на рассылку обновлений по электронной почте о программе открытых данных SEC, включая передовые методы, которые делают загрузку данных более эффективной, и улучшения SEC.gov, которые могут повлиять на процессы загрузки по сценариям. Для получения дополнительной информации обращайтесь по адресу [email protected].
Для получения дополнительной информации см. Политику конфиденциальности и безопасности веб-сайта SEC. Благодарим вас за интерес к Комиссии по ценным бумагам и биржам США.
Идентификатор ссылки: 0.5dfd733e.1627303875.18067d2e
Дополнительная информация
Политика безопасности в Интернете
Используя этот сайт, вы соглашаетесь на мониторинг и аудит безопасности. В целях безопасности и обеспечения того, чтобы общедоступная услуга оставалась доступной для пользователей, эта правительственная компьютерная система использует программы для мониторинга сетевого трафика для выявления несанкционированных попыток загрузки или изменения информации или иного причинения ущерба, включая попытки отказать пользователям в обслуживании.
Несанкционированные попытки загрузить информацию и / или изменить информацию в любой части этого сайта строго запрещены и подлежат судебному преследованию в соответствии с Законом о компьютерном мошенничестве и злоупотреблениях 1986 года и Законом о защите национальной информационной инфраструктуры 1996 года (см. Раздел 18 U.S.C. §§ 1001 и 1030).
Чтобы обеспечить хорошую работу нашего веб-сайта для всех пользователей, SEC отслеживает частоту запросов на контент SEC.gov, чтобы гарантировать, что автоматический поиск не влияет на возможность доступа других лиц к контенту SEC.gov. Мы оставляем за собой право блокировать IP-адреса, которые отправляют чрезмерные запросы. Текущие правила ограничивают пользователей до 10 запросов в секунду, независимо от количества машин, используемых для отправки запросов.
Если пользователь или приложение отправляет более 10 запросов в секунду, дальнейшие запросы с IP-адреса (-ов) могут быть ограничены на короткий период.Как только количество запросов упадет ниже порогового значения на 10 минут, пользователь может возобновить доступ к контенту на SEC.gov. Эта практика SEC предназначена для ограничения чрезмерного автоматического поиска на SEC.gov и не предназначена и не ожидается, чтобы повлиять на людей, просматривающих веб-сайт SEC.gov.
Обратите внимание, что эта политика может измениться, поскольку SEC управляет SEC.gov, чтобы гарантировать, что веб-сайт работает эффективно и остается доступным для всех пользователей.
Примечание: Мы не предлагаем техническую поддержку для разработки или отладки процессов загрузки по сценарию.
% PDF-1.4 % 198 0 объект > эндобдж xref 198 85 0000000016 00000 н. 0000002780 00000 н. 0000002906 00000 н. 0000002958 00000 н. 0000003239 00000 н. 0000003274 00000 н. 0000003392 00000 н. 0000003510 00000 н. 0000004353 00000 п. 0000004493 00000 н. 0000004530 00000 н. 0000005159 00000 н. 0000006435 00000 н. 0000007274 00000 н. 0000008408 00000 п. 0000009511 00000 н. 0000010821 00000 п. 0000011470 00000 п. 0000012036 00000 п. 0000017762 00000 п. 0000020685 00000 п. 0000028115 00000 п. 0000028530 00000 п. 0000030530 00000 п. 0000031077 00000 п. 0000031593 00000 п. 0000031636 00000 п. 0000031669 00000 п. 0000031723 00000 п. 0000032479 00000 п. 0000034179 00000 п. 0000035874 00000 п. 0000037653 00000 п. 0000039323 00000 п. 0000041283 00000 п. 0000042684 00000 п. 0000044230 00000 п. 0000045823 00000 п. 0000047484 00000 п. 0000049182 00000 п. 0000050327 00000 п. 0000051927 00000 н. 0000053608 00000 п. 0000055327 00000 п. 0000057714 00000 п. 0000059744 00000 п. 0000061800 00000 п. 0000063136 00000 п. 0000064669 00000 н. 0000066452 00000 п. 0000067779 00000 п. 0000069161 00000 п. 0000070639 00000 п. 0000072143 00000 п. 0000073897 00000 п. 0000075519 00000 п. 0000077070 00000 п. 0000078706 00000 п. 0000080410 00000 п. 0000082438 00000 п. 0000084400 00000 п. 0000086270 00000 п. 0000087658 00000 п. 0000089378 00000 п. 0000091401 00000 п. 0000093139 00000 п. 0000095258 00000 п. 0000097930 00000 н. 0000100150 00000 н. 0000102214 00000 н. 0000104450 00000 н. 0000106474 00000 н. 0000108499 00000 н. 0000110619 00000 н. 0000112570 00000 н. 0000113942 00000 н. 0000115476 00000 н. 0000117183 00000 н. 0000118505 00000 н. 0000119677 00000 н. 0000119760 00000 н. 0000141746 00000 н. 0000141970 00000 н. 0000144201 00000 н. 0000001996 00000 н. трейлер ] / Назад 188602 >> startxref 0 %% EOF 282 0 объект > поток hb«`e`c` @ (1AѩKD # `S + [], T6p`P [.$ pA; Հ SHcb
УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ФОНД FBS
taageero Dhismayaasha waa qayb ка мид ах dhismaha, kaas oo lagu wareejiyo load си салка dhismeedka, лежащая над ах. Его nooca warsaa ka go’an inta lagu guda jiro design dhismayaasha. Isagu waa inuu yahay mid aad u xooggan oo la isku halayn karo.
aasaaskii FBS waa воск soo saarka la taaban karo ugu caansan. Маанта, ваа воск ка дхисмаха аасаасига ах ее ло истикмаало дхисмаха йо раагая суджинта дхисмаха салдхигга, си ай у абуураан салдхиг, оо дербиядееда хостииса.
aasaaska soo saaray ka FBS и dhirta gaar ah technology block-sameynta iyada oo la raacayo shuruudaha ГОСТ. Его воск soo saarka si joogto аh воскаа gacanta ку Warshadii OTC leexashooyinkaasi joomatari oo tayada kale. блокирует воскаа ла самееи и ее ла таабан каро, таас оо ка мид ах дхагакс адаг ла джаджабийей, кайб хоог йо худжинта дзир ее си кордхайя. Су-саареяаша аяа воскай сузаараан шахадо оо келия алаабта оо тайо саре лех.
aasaaska codsiga Its ka FBS laga helay dhismaha oo baaxad weyn, iyo kuwa gaarka ах.Waxa loo isticmaalaa in carradu oo dhan. Iyada oo ку xidhan nooca ciidda kala duwan yihiin oo kaliya si qoto dheer ee ugu cadcad inuu. PBS waa la heli karaa в miisaanka iyo tirada kala duwan. Продается waa tiro balaadhan oo ah soo saarka — waa blocks oo kala duwan oo adag aasaaska, tiirka iyo cajalad.
Haddii aasaaska ka FBS loo baahan yahay gaar ah size iyo guryaha, saarayaasha qaadato dalabysi amara.ay rakibaadda fuliyay по технологии dhagaaxda — waa tolay ligation taxane hore, ay gacanta ku goobta saxda ah ee блокирует си ixtiraam leh в midba midka kale. фииро гаар ах воскаа ла сиииа набор угу хоррайсай ее хубно ка, каас оо воскаа ла гиияа меэль гаар ах ло дияарийей.
aasaas ka блоков FBS Waxaa la dhigayaa on sibidhka dheeriga ah ee ciid. Waxaa loo isticmaali karaa для этого ujeedada, xabagta gaar ah, laakiin inta badan ka qaalisan waa, si doorasho ugu horeysay ka badan la aqbali karo waa.Xalku waa isku dhafan si toos ah на сайте. Ку Ракибидда Саксда ах мееша шакада ка мид ах дхисмаяаша ай дхачдо в дхакдхакаака ее чидда ама бийаха дхулка.
dhismaha aasaas ka FBS nooca suunka Waxay ku bilaabmaa ka qoday meel in qoday si qoto dheer looahan yahay. Маркаас воскаа ку деднаа чийд, трамбовка адаг, оо калия маркаас унугьяда ку ракибан йихиин. Си ай у фулияан дхисмаха шукуллада ку луг калаб гаар ах оо кодая его бог оо желаю для блоков Саргаал, фикни ла таабан каро, ийо коох ка мид ах шакаалаха.Waa in aynaan illoobin in shuqulka oo dhan ka hor inta design khasab iyo iyada oo la tixgelinayo oo dhan тонкости ee shaqada: joogitaanka tirada loo baahan yahay iyo tayada qalabka dhismaha, kaleebida
Faa’iidada ugu weyn ee aasaaska noocan oo kale ah waa ay dhismaha deg deg ah ee dhismaha in uu yahay muhiim. Из блоков, kuwaas oo joogto kakanaanta kala duwan. PBS loo isticmaalo dhismaha dhismayaasha dhaadheer ee multi-dabaq iyo height yar oo ka mid ah dhismayaasha.

ГОСТ 13579-78 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия / 13579 78

ГОСТ 13579-2018 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия

Текст ГОСТ 13579-2018 Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия

БЛОКИ БЕТОННЫЕ ДЛЯ СТЕН ПОДВАЛОВ Технические условия

ммжжя

Блоки ФБС ГОСТ: фундаментные блоки 13579 78

Понятие ФБС

Свойства блоков

Технология изготовления

Размеры и маркировка

Общие черты применения блоков

Блоки стен подвалов (ФБС) Блоки ленточных фундаментов (ФЛ)

ГОСТ на блоки ФБС

Конструкция и применение

Размеры изделий

Технические характеристики

ФБС 24-4-6 с по стандарту: ГОСТ 13579-78

ГОСТ и ТУ на ФБС блоки

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ФОНД ИЗ ФБС

Влияние добавления среды и последовательного пассирования на транскриптом стромальных клеток, полученных из жировой ткани человека, расширенных in vitro

Характеристика ASC

Анализ экспрессии генов ASC, расширенных в pHPL и FBS

FBS | NORMA Group

Цельные зажимы — пружинные хомуты для шлангов

Хомуты с пружинной лентой в соотв.с DIN 3021

Стимулированный гоногенами переход эмбриональных стволовых клеток мыши с усиленным контролем различных путей дифференцировки

После индукции GoST клетки выживают в условиях, лишенных LIF и βME.

В клетках GoST снижена пролиферация клеток

Клетки GoST испытывают остановку фазы G1 / S с повышающей регуляцией специфического для фазы G1 / S ингибитора CDK p27

Клетки GoST сохраняют экспрессию основных маркеров плюрипотентности, что исключает возможность соматической дифференцировки

Уровни экспрессии Dazl различают две разные клеточные популяции.

Гены, специфичные для индукции гоноцитов, активируются при индукции GoST

Экспрессия Nanos2 повышена в клетках GoST

Клетки GoST развиваются в клетки, экспрессирующие Tex101, после высвобождения из индукции GoST

Клетки GoST подавляют экспрессию Cxcr4 и SSEA1, но продолжают экспрессировать TRA98 после выхода из индукции GoST

GoST-клетки демонстрируют равный или лучший потенциал многолинейной дифференцировки

SEC.gov | Превышен порог скорости запросов

Дополнительная информация

Политика безопасности в Интернете

УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ФОНД FBS

Ответить Отменить ответ